骨桥蛋白在颅咽管瘤钙化过程中的作用机制研究

颅咽管瘤的发病机制、病理改变、生物学特性发生机制迄今仍不清楚，目前临床治疗存在术后反复复发和遗留严重并发症两大难题，给我们带来了无法回避的医疗和社会问题；迫切需要在其基础研究上有突破性的进展。我们的前期研究已经证实了颅咽管瘤的钙化是一个主动的过程；经过10余年对颅咽管瘤各种相关因子的不断筛选研究，我们发现了骨桥蛋白是颅咽管瘤钙化的核心蛋白。由此，我们首次提出了颅咽管瘤钙化成因的新机制，即：骨桥蛋白基因在颅咽管瘤细胞中的过度激活是颅咽管瘤钙化形成的关键。进一步实验显示：骨桥蛋白是颅咽管瘤钙化、囊变、易复发以及对周围结构侵袭严重的核心蛋白。本项目拟进一步采用SiRNA的方法，旨在获得OPN在颅咽管瘤细胞钙化过程中的作用机制。本研究将有望同时阐明OPN对颅咽管瘤钙化、囊变及侵袭性的调控作用和机制，以期为颅咽管瘤基因治疗提供更充分的科学依据。

本项目执行三年来，已按计划取得好的成果，培养了多名科研技术骨干，具体内容如下：根据研究计划，完成了实验细胞培养及干预实验，确立了培养大量生长稳定的颅咽管瘤细胞的方法及细胞储备建立多种类型的颅咽管瘤模型、颅咽管瘤细胞干预体外模型具体包括：.（1）完成建立了颅咽管瘤细胞分离培养的方法。.（2）建立了颅咽管瘤细胞培养基体系。.（3）建立了颅咽管瘤细胞培养检测流程，通过流式细胞仪及细胞免疫组合检测角蛋白标记物的方法初步建成快捷的细胞鉴定流程。基本建立了颅咽管瘤细胞的体外模型及裸鼠模型。.（4）开展颅咽管瘤细胞的体外、体内干预研究，通过采用电转染的方法对OPN的表达进行干扰，观察体外模型细胞及裸鼠皮下种植细胞的细胞生物学特征及生长曲线。采用已纯化的颅咽管瘤细胞悬液，通过裸鼠皮下种植的方式尝试建立颅咽管瘤移植瘤模型。.（5）建立了颅咽管瘤外科学分型体系，提出颅咽管瘤手术的治疗理念，就颅咽管瘤的生长方式与外科学分型提出了一种新标准，对该疾病的外科理解起到了革命性的进步。.（6）开展颅咽管瘤生长形态相关颅内膜性结构研究，通过对临床病例影像学及手术过程中肿瘤生长形态及生长起源点的研究对比研究尸头解剖鞍区蛛网膜结构对颅咽管瘤的生长形态及生长方式进行分类，建立了指导颅咽管瘤手术方案设计的颅咽管瘤生长形态分类体系。.（7）开展OPN在颅咽管瘤钙化作用机制的相关信号通路Runx2/Osterix-OPN通路的研究。我们的研究发现发现骨桥蛋白这一成骨通路上的下游功能蛋白是钙化的核心因子；进一步证实了颅咽管瘤钙化是一个主动的可控的过程。.（8）开展与OPN介导的颅咽管瘤钙化密切相关的炎症性因子的研究。我们发现IFN-α在成釉细胞型颅咽管瘤中表达最为明显，主要在肿瘤细胞胞核中；而TGF-β1则在鳞状细胞型颅咽管瘤中表达明显。炎症作为机体防御机制，炎症因子IFN-α、TGF-β1可以调节Fas/FasL的表达，并调节肿瘤细胞的增殖。.（9）理论上，研究OPN介导颅咽管瘤钙化信号通路中关键节点，特别是在此通路中与炎症相关的关键因子，研究OPN在颅咽管瘤特殊生物学特性中的作用方式及具体信号通路，探讨OPN抑制理论的可行性。建立了颅咽管瘤外科学分型体系，提出颅咽管瘤手术的治疗理念，就颅咽管瘤的生长方式与外科学分型提出了一种新标准，对该疾病的外科理解起到了革命性的进步。