核呼吸因子-1在c-Myc介导的线粒体凋亡途径中的作用

c-Myc在细胞凋亡中扮演着非常复杂的角色，一个最重要途径为c-Myc导致细胞色素c(cytochrome c, Cyt c)释放启动细胞线粒体凋亡途径。Cyt c是调控线粒体DNA转录与复制的核呼吸因子-1(nuclear respiratory factor 1, NRF-1) 的一个靶基因，因此推测NRF-1在该凋亡途径中可能起着重要的作用。本研究利用作用模式不同的毒物处理细胞，运用质粒转染、siRNA及报告基因等技术，通过对前致死效应、致死效应和可能分子事件的检测，探讨NRF-1及其丝氨酸磷酸化水平以及Cyt c释放孔道的选择性等在c-Myc介导的线粒体凋亡途径中的作用。一旦NRF-1在该路径中的角色被确认，将为毒物引起的与c-Myc介导的线粒体凋亡相关疾病的预防、治疗及相关药物的研制提供重要理论依据。

项目的完成情况及取得成果. 1、证明了NRF-1在基因毒性物质B(a)P介导的人支气管上皮细胞（16HBE）线粒体损伤过程中发挥保护作用，B(a)P致16HBE恶性转化过程中NRF-1及其下游的调控基因mtTFA表达下降，shRNA NRF-1可以使B(a)P介导的线粒体氧化应激损伤加重，ROS产生增加，ATP合成减少。. 成就：相关文章发表在Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology (2011年，IF：2.179)以及Environmental Toxicology（2012年，online，IF：2.708）。. 2、确定了两种化学毒物遗传毒物反式二羟环氧苯并比(BPDE）、线粒体毒性物质MnCl2介导的细胞凋亡路径。两种毒物均介导细胞内源性caspase-9介导的凋亡，而非胞外caspase-8途径。MnCl2介导的细胞凋亡过程中，线粒体PTP孔道开放，线粒体膜电位降低，细胞色素C释放，激活caspase-9介导的凋亡级联反应。而在BPDE介导的线粒体凋亡过程中线粒体PTP孔不开放，但细胞色素C仍然可以释放至细胞浆，启动caspase-9介导的凋亡级联反应。. 成就：相关文章发表在Food and Chemical Toxicology （2012年，IF：3.01），和Human and Experimental Toxicology （2013年，IF：1.453）。. 3、研究了两种不同模式毒物作用于细胞后NRF-1的磷酸化水平，BPDE可以使NRF-1丝氨酸磷酸化水平增加，MnCl2使NEF-1发生去磷酸化。同时利用免疫共沉淀的方法探讨了NRF-1，c-Myc以及细胞色素C的交互作用，两种受试物作用后并为发现三者存在交互作用。相关文章正在撰写中。. 4、转染cDNA NRF-1后，细胞凋亡降低，目前NRF-1高表达后的凋亡路径改变正在进行。 . 5、依托于该项目，我们开展了人群的伤害致死趋势及疾病负担的研究，相关文章发布与Plos One(2014年,IF:3.73)