染色体DNA复制起始蛋白Sap1/Girdin的生化功能研究

DNA复制是人细胞最基本的生命活动之一，而DNA复制起始是DNA复制的第一步。本实验室发现裂解酵母的Sap1蛋白和人细胞的Girdin蛋白都参与到DNA复制起始过程中，Sap1/Girdin的缺失，会导致Cdc18/Cdc6不能结合到染色体上。基于这一重大发现，我们纯化了Sap1、Cdc18、Girdin等一系列蛋白，准备通过生物化学、遗传学等方法将Sap1与Cdc18的相互作用域及关键氨基酸确定出来，同时也深入研究Sap1/Girdin蛋白与DNA具体的相互作用机制。我们将同时分析Sap1的晶体结构以及它和Cdc18蛋白在checkpoint过程中的重要作用。这些研究深化我们对DNA复制起始过程以及DNA复制源结构的理解，对该领域起到推动作用，同时为进一步筛选和确定人的DNA复制源打下重要铺垫。

DNA 复制是人细胞最基本的生命活动之一，而DNA 复制起始是DNA 复制的第一步。本实验室发现裂殖酵母的Sap1 蛋白参与DNA 复制起始过程，Sap1的缺失，会导致DNA复制起始蛋白Cdc18/Cdc6 不能结合到染色体上。基于这一重大发现，我们进一步深入研究了Sap1与DNA 具体的相互作用机制。我们获得了Sap1蛋白DNA结合结构域的晶体，并通过X射线衍射的方法分析了其结构；通过核磁共振的方法确定了Sap1与DNA相互作用的关键氨基酸残基及Sap1的DNA结合序列。通过ChIP-seq方法准确确定了裂殖酵母的所有DNA复制源。研究确定了Sap1复制起始功能的调控机制。这些研究深化我们对DNA 复制起始过程以及DNA 复制源结构的理解，对该领域起到推动作用，同时为进一步筛选和确定人的DNA 复制源打下重要铺垫。