酵母与人类DNA复制起始蛋白的鉴定及功能研究

为保证遗传信息准确传代，细胞必须严格控制DNA复制的起始，以保证基因组在每个细胞周期中恰好复制一次。DNA复制不仅是一个最基本的细胞过程，而且与癌症密切相关。所有的癌细胞在分裂之前必须复制其基因组；一些DNA复制起始蛋白在癌细胞中过表达，但在~90%的正常细胞（处于非分裂期）中不表达，因此，抑制这些蛋白将有效阻止DNA复制和癌细胞的增殖，而对大部分正常细胞无损。近二十年来，酵母DNA复制起始的研究不断取得进展，是国际上真核生物细胞周期研究的热点。真核细胞DNA复制的起始由复制子及与其作用的复制起始蛋白控制。寻找酵母与高等生物中新的复制起始蛋白，并阐明其作用机制，具有重要的理论意义和应用前景。本项目拟利用我们新发明的酵母遗传方法鉴定新的酵母DNA复制起始蛋白，并采用分子生物学与生物化学方法进行功能研究，进而克隆和研究人的同源蛋白。这项研究将有助于阐明DNA复制机理，并加快人类攻克癌症的进程。

本项目的主要目标是研究酵母和人类的DNA复制起始蛋白，以建立新型的抗癌靶标，为开发出高效低毒的抗癌药打下基础。我们已经达到了项目的目标，完成了如下研究内容：.1..首次发现并深入研究了酵母DNA复制起始蛋白Ipi3p，并阐明Ipi3p在DNA复制中必不可少的功能及其细胞周期控制规律。有关论文已发表于Cell Cycle, 2012。.2..首次发现并深入研究了最核心的酵母和人类DNA复制起始蛋白ORC的二聚化，并阐明了ORC二聚化在DNA复制中必不可少的功能、半保守性及其细胞周期控制规律。论文将要投稿。.3..发现并研究了人类DNA复制起始蛋白hCDC6及其调控miRNA (miRNA-26a/b)在肺癌中的表达失控、功能及机理。论文已发表于Molecular Cancer Research, 2014。.4..证明了人类hIPI3和hNOC3在人类细胞DNA复制中必不可少的功能及其细胞周期控制规律。有关hIPI3的论文已投稿PLOSONE并已被审稿，修改版已再交回该杂志，预计本月内被接收。有关hNOC3的论文在撰写中。