药物代谢相关的人细胞色素P450转基因细胞系的建立

从人肝组织中提取细胞总DNA经RT-PCR扩增cDNA片段，克隆到PGEM-T中，经全序列鉴定，再亚克隆入真核表达载体pREP9转染中国仓鼠肺细胞，建立了与人体内药物代谢相关的人细胞色素P450转基因细胞系包括CHL-3A4，CHL-2C9，CHL-2C18和CHL-2D6等。应用手性色谱学原理，建立了同时测定普罗帕酮、普萘洛尔、美芬妥英等手性药物的对映体选择性分析方法。应用细胞生物学和药物代谢技术，以人肝细胞色素P450转基因细胞系为人体内药物代谢的酶源，结合立体选择性分析方法，研究了普罗帕酮、普萘洛尔、美芬妥英等手性药物对映体代谢的差异及其相互作用。该系列稳定表达单一人CYP药物代谢酶基因的细胞系还可用于新药筛选和外源物对人类危害的评价检测。