人CYP转基因细胞系的建立及在诱变试验中的应用

从人肝组织中RT-PCR扩增CYPLA2，CYP2A6，CYP2E1和CYP3A4 cDNA片段。克隆到T-A载体中，全序列测定鉴定，再亚克隆入真核细胞表达载体pREP9，转染中国仓鼠肺细胞CHL，建立了CHL-1A2，CHL-2A6，CHL-2E1，CHL-3A4四个转基因细胞系。分别测定各转基因细胞的特异代谢酶活性，前致癌物的细胞毒试验和微核试验。DNA测序显示所克隆的各P450 cDNA序列与国外报道的序列基本符合，但也有一定的差异，结合P450基因的多态性，有可能是中国人P450基因的特点。建立的转基因细胞系具有代谢活化前致突变物/致癌物的能力。用基因工程建立稳定表达人P450酶的转基因细胞具有诸多优点，该系列转基因细胞系还可用于多种外源化学物质对人类危害度的评价和检测。