Pseudomonas putida DLL-1甲基对硫磷趋化基因的克隆及其与降解基因的关系研究

细菌的趋化性在污染物原位生物降解过程中具有重要作用，细菌对污染物的趋化机制以及细菌趋化性和降解性之间的关系研究已成为热点之一，然而，降解性细菌对有机磷类农药的趋化性及其趋化基因研究目前还未见报道。本项目以甲基对硫磷高效降解菌株P. putida DLL-1及其趋化物甲基对硫磷为研究材料，通过基因打靶技术失活甲基对硫磷水解酶mpd基因和趋化信号转导cheA基因，研究趋化性的诱导性并揭示趋化性在污染物原位降解中的作用；通过鸟枪法建库克隆和转座子随机插入突变等技术，克隆甲基对硫磷趋化受体蛋白基因（mcp）以及其它趋化相关基因，阐明菌株对甲基对硫磷的趋化机制；并通过Tail-PCR，RT-PCR等技术，研究趋化基因和降解基因之间的物理位置和转录调控关系，为调控趋化基因提高微生物原位降解污染物的效果提供理论依据，为构建新一代高效降解基因工程菌和设计新型生物修复系统提供新思路。