抗人黑色素瘤/抗人CD3基因工程双特异抗体的研究

本研究采用add-on PCR 和SOE法将抗人CD3和抗黑色素瘤抗体可变区基因通过一编码15个氨基酸（Gly4Ser)3连续肽的LinKer序列串联分别构建了抗人CD3和抗黑色素瘤单链抗体基因。将其导入大肠秆菌获得高效表达，表达产物分别占细菌总蛋白42%和35%。经纯化、复性后两种单链抗体均具有较好抗原素和法性和结合转异性。在此基础上，又用上述方法将两种单链抗体串联，构建了抗人CD3/抗黑色素瘤双转异抗体，并获得分泌性表达，表达量占细菌总蛋白15%，同时，对融合型、非融合型及分泌型表达载体中表达情况进行了分析比较。对基因工程抗体的表过进行了有益的探索。本研究对黑色素瘤的免疫治疗及抗体蛋白质工程的研究具有一定意义。