电针夹脊穴对吗啡复吸大鼠渴求行为干预的中枢机制研究

To observe acupuncture on methamphetamine addiction withdrawal symptoms therapeutic effect, and compare the different acupuncture Based on the "acupuncture detoxification" of clinical and experimental research base, and previous studies have shown that the close relationship between electricity JiaJi related neurotransmitters and receptors, dopamine at home and abroad, and related research NMDA receptors and relapse progress. Asked: "Electric JiaJi involved in the regulation of dopamine, NMDA receptors may be related to one of its key central mechanism of relapse intervention" hypothesis. Applicants preliminary study found that dopamine neurons projecting classical pathway of the DA and its receptor protein expression associated with morphine addiction relapse. On this basis, the project is intended to be self-administered morphine in rat models for the study of relapse, the integrated use of immunohistochemistry, Western blot techniques, by exploring electric JiaJi intervention morphine relapse process, the classic DA projected path related neurotransmitters (DA), transporter (DAT), changes in receptor (D1R, D2R) and synthesis rate-limiting enzyme (TH) and other indicators, electric JiaJi clarify the physiological basis of relapse in morphine.

基于“针刺戒毒”的临床和实验研究基础，以及前期研究表明电针夹脊穴对相关神经递质及受体的密切关系，结合国内外多巴胺、NMDA及其相关受体与复吸的研究进展。提出：“电针夹脊穴参与调控多巴胺、及其相关受体、转运蛋白可能是干预复吸的关键中枢机制之一”的假说。申请者前期研究发现经典多巴胺神经投射通路DA及其受体的蛋白表达与大鼠吗啡成瘾后复吸相关。在此基础上，本项目拟以大鼠自身给药吗啡复吸为研究模型，综合运用免疫组化、Western blot等技术，通过探求电针夹脊穴干预吗啡复吸过程中，经典DA投射通路相关神经递质（DA）、受体（D1R、D2R）、转运蛋白（DAT）及其合成限速酶（TH）等指标的变化，阐明电针夹脊穴在吗啡复吸中的生理基础。

药物渴求的中枢神经基础是从中脑腹侧被盖区到前脑的多巴胺投射通路（VTA-NAc DA 通路），是阿片类药物引起精神依赖的轴心部位，也是毒品依赖、难以戒除的主要原因。因此多巴胺（DA）系统在药物奖赏机制中起重要作用。该研究采用大鼠吗啡复吸模型为研究平台，以吗啡复吸大鼠与正常大鼠中枢DA信号通路中多巴胺受体（D1R、D2R）、多巴胺转运蛋白（DAT）及多巴胺合成限速酶（TH）、反应神经元受损程度的标志物（GFAP）的差异表达为切入点，探讨电针夹脊穴对该信号通路的影响及与复吸的关系。研究结果表明：连续吗啡自身给药及吗啡诱导可以造成大鼠对吗啡的依赖和复吸，电针夹脊穴治疗可以显著减少吗啡复吸大鼠的触鼻数及吗啡给药次数。吗啡复吸使大鼠VTA、NAc、PFC脑区TH、GAFP含量增加，VTA脑区多巴胺D2受体、DAT减少，NAc脑区D1受体增加、D2受体、DAT减少，PFC脑区D1受体减少、D2受体增加，电针夹脊穴治疗后上述脑区各指标均呈现改善效应，并趋于正常，与模型组、绑缚对照组相比，有统计学差异，与DAR阻滞剂1-THP结果一致。上述结果显示：（1）吗啡自身给药可以使大鼠形成对吗啡的依赖和复吸，电针夹脊穴治疗可以显著抑制吗啡诱导的大鼠复吸行为，抑制大鼠对吗啡的渴求程度。（2）吗啡复吸会造成大鼠中枢VTA-NAc DA 通路相关脑区多巴胺关键蛋白及其受体（D1R、D2R、DAT）的差异表达，以及多巴胺合成限速酶、反应神经元受损程度的标志物（TH、GFAP）不同程度的增加或减少。佐证了药物渴求发生的主要中枢神经基础——从中脑腹侧被盖区(VTA)到前脑的多巴胺 (DA)投射通路介导了大鼠对吗啡的渴求。（3）电针夹脊穴治疗后，VTA-NAc DA 通路中上述脑区的相关指标均呈现改善效应，并趋于正常。电针夹脊穴可能通过对该奖赏通路中多巴胺关键蛋白的干预及神经元的“修复”作用调节了大鼠对吗啡的渴求，为研究者提出的“夹脊治五脏瘾”这一学术观点提供了实验室依据。