microRNAs参与骨髓增生异常综合征发生及白血病转化的分子机制研究

探明骨髓增生异常综合征（MDS）发病机制及白血病转化机理是改善MDS恶劣预后的关键所在。MicroRNAs(miRNAs)表达异常在造血干细胞向MDS干细胞突变过程中起重要作用，很可能是MDS发生和白血病转化的重要机制。在前期研究建立造血干细胞miRNAs表达谱的基础上，本项目拟流式细胞分选不同分型、不同阶段MDS患者骨髓或外周血MDS干细胞（CD34+CD38-）；实时定量RT-PCR法检测miRNAs表达变化，筛选3-5个有意义的miRNAs；通过miRNAs作用靶点的预测及验证，并建立低表达及高表达miRNAs的MDS干细胞体系，离体实验和在体实验检测MDS干细胞恶性表型改变，探索miRNAs参与造血干细胞受损、MDS发生及白血病转化的分子机制。研究结果对阐明MDS发病机制具有重要的理论意义，对防治MDS发生及白血病转化具有广阔的应用前景。

MicroRNAs(miRNAs)表达异常在造血干细胞向骨髓增生异常综合征（MDS）干细胞突变过程中起重要作用，很可能是MDS发生和白血病(AML)转化的重要机制。在建立造血干细胞miRNAs表达谱的基础上，结合生物信息学分析，获得了MDS向AML转化过程中起重要作用的候选miRNAs分子（miR-129-5p、miR-520h、miR-200c、miR-181a、hsa-miR-495、miR-590-3p、miR-373*）；利用磁珠法从AML细胞株（HL-60、THP-1）中分选获得CD34+肿瘤干细胞，实时定量RT-PCR法检测miRNAs表达变化，发现miR -200c和miR-590-3p在AML CD34+造血细胞中低表达，而其余miRNAs在AML CD34+造血细胞中高表达；利用荧光素酶报告基因体系验证miRNAs作用靶点，结果证实miR-520h作用于ACCG2基因，miR-200C作用于PDCD10基因，miR-373*作用于EIF4A1基因；将miR-520h、miR-495及miR-181a激动剂或抑制剂转染CD34+造血细胞后，可改变造血细胞的分子表型。研究结果是对MDS发生发展分子机制的新认识，为防治MDS及白血病转化奠定了基础。