新的分泌蛋白FAM96A在肠道区域免疫和小鼠结肠炎模型的作用机制研究

Ulcerative colitis(UC) is a most common chronic inflammatory desease which is caused by intestinal local immunity disorders. UC causes a ruinous disaster and people haven’t realized its definite mechanism. We have identified a novel secretory protein FAM96A ,which played an important part in DSS induced colitis model. Fam96a knock-out mice showed more evident symptom, while FAM96A transgenic mice displayed reduced impairment.rhFAM96A was also protective in the model .We hope to study the mechanism for the regulatory role of FAM96A in intestinal local immunity, to study the its distribution in intestinal local immune tissues and different cells; to figure out its function on mucous epithelia ,ILCs, macrophages and DCs ;to find out and identify its target cells and receptor; to study the mechanisms for its regulation of IL-23 and IL-22 expression;to study its complicated signal pathway; Ultimately,we will clarify the definite mechanism of the protective function FAM96A exerts via regulation of intestinal local immunity.. Our research will elucidate the role of FAM96A in intestinal local immunity, which is an important supplement for current intestinal local immunity theory; identification of FAM96A target cells and receptor may provide a novel therapeutic way,and has potential application prospects .

溃疡性结肠炎是一种最常见的慢性炎症性疾病，危害极大。我们发现新的分泌蛋白FAM96A在DSS诱导的结肠炎动物模型中具有明确的保护作用。Fam96a-/-鼠结肠炎症状明显加重，转基因鼠症状减轻。rhFAM96A对结肠炎具有保护作用。该项目是研究FAM96A参与肠道区域免疫调节和在结肠炎中作用机制。研究FAM96A在肠道区域免疫组织和各类细胞中表达分布特点；FAM96A对肠道粘膜上皮细胞、固有淋巴样细胞、巨噬细胞和DC的作用；寻找、确定FAM96A的靶细胞和受体，研究FAM96A调控IL-23和IL-22表达机制，研究FAM96A的信号转导通路，最终阐明FAM96A如何通过对肠道区域的免疫调节而对结肠炎起到了保护作用。通过该研究可以阐释FAM96A对肠道区域免疫的作用，对丰富肠道区域免疫的理论是一个重要的补充；确定FAM96A的靶细胞和受体可以对结肠炎提供新的治疗思路，有潜在的应用前景。

溃疡性结肠炎是一种最常见的慢性炎症性疾病，危害极大，但是该病目前的发病机制不清，这对于疾病的有效防治是一个巨大的障碍。我们研究发现FAM96A在DSS诱导的结肠炎动物模型中具有明确的保护作用，但是这仅是一个表型，希望进行更深入的研究，以期在溃疡性结肠炎的发病机制研究中有所贡献。在获得重大研究计划培育项目的资助后主要对FAM96A在结肠炎中的作用机制及在肠道区域免疫中的作用机制进行了研究。为了确定FAM96A作用的靶细胞我们制备了巨噬细胞和肠上皮细胞特异敲除的老鼠；为了研究其机制通过CRISPR/Cas9技术制备了2种巨噬细胞系Fam96a基因敲除细胞。确定了FAM96A具有分泌形式和经典的信号肽；研究发现FAM96A可以直接影响肠上皮细胞的功能，Fam96a KO鼠肠道的杯状细胞分泌增多，MUC2表达增多；老鼠肠道菌群发生明显的变化，通过肠道菌检测和合笼实验确定了FAM96A可以通过肠道菌影响肠道上皮细胞的结构和功能，进而影响结肠炎症。在AOM-DSS诱导的结肠炎到结肠癌模型中，FAM96A起到了明确的保护作用，与野生鼠相比Fam96a KO鼠肠道肿瘤个数明显增多，肿瘤体积增大，在野生鼠还处于腺瘤阶段时基因敲除鼠的肠道肿瘤已经侵袭到了肌层。而我们在转基因鼠皮下种植肿瘤与野生鼠相比，转基因鼠的肿瘤生长受到抑制，体积明显小，因此结果表明FAM96A能够抑制瘤的发生发展。FAM96A在LPS诱导的内毒素休克模型中也具有重要作用，当用化学试剂把巨噬细胞清除后，FAM96A的作用就消失了。FAM96A能够抑制巨噬细胞向M1极化。通过免疫共沉淀和GST-PUIIDOWN在巨噬细胞中找到了FAM96A的相互作用分子PKM,这是一个参与糖代谢的分子，推测FAM96A在内毒素休克中的作用与巨噬细胞的功能有密切关系，而这种作用的发挥可能与细胞的糖代谢有密切关系。在项目的研究中有很多重要而有趣的发现，需要继续研究。在项目的执行中毕业了一个博士研究生，另外还有一名博士生今年毕业，一名硕士生明年毕业。标注基金号的文章有4篇，另有有2篇AM96A的文章在投。