新基因FAM96A在抑制肿瘤细胞上皮间质转化中作用及机制研究

我们克隆了新基因FAM96A，运用RNA干扰技术在多种上皮来源肿瘤细胞内敲减FAM96A，可以诱导细胞发生形态学、骨架、接触方式的改变；显著下调CDH1、KRT18等上皮特征性分子，上调间质细胞特征分子以及多种肿瘤预后不良高风险转录因子。细胞迁移、侵袭能力显著增强。诱导肿瘤细胞产生了明确的EMT变化。加入FAM96A可以抑制或逆转此种EMT现象。乳腺癌、肺癌组织芯片证实，FAM96A在肿瘤组织表达显著下调。提示FAM96A对EMT有重要的抑制作用，可能是一个新的肿瘤转移抑制分子。FAM96A的结果我们已经申请了国家发明专利，具有自主知识产权，此项工作属于源头创新。继续对其深入研究，特别是机制的研究和体内作用研究具有重要的理论和应用价值。理论上，通过对这个基因的机制研究将有助于阐明EMT发生机制和肿瘤转移的机制，发现负向调节EMT的新分子。应用上，FAM96A可能是一个新的重要抑癌基因。

项目背景：我们通过生物信息学的方法克隆了人类基因FAM96A，又名FLJ22875。在我们申请该项目时没有任何研究文章发表，因此是将其作为一典型的功能未知新基因进行研究的。在研究的过程中有文章陆续发表，但是与我们的研究方向没有过多的交叉。初期的研究结果证实： FAM96A表达水平降低直接诱导多种上皮来源肿瘤细胞发生上皮-间质变迁（EMT），提示FAM96A对EMT有重要的抑制作用，从而对于EMT相关的生长发育、创伤愈复、纤维化疾病、肿瘤发生与发展可能有着重要的意义，可能是一个新的肿瘤转移抑制分子。FAM96A抑制上皮间质变迁的作用迄今未见任何报道，因此，我们的研究完全是原创性的。.主要研究内容：在获得了基金资助后制备了Fam96a基因敲除鼠和FAM96A转基因鼠，制备了FAM96A的单克隆抗体。对FAM96A从两个方面进行了研究：炎症和肿瘤。. 肿瘤：对肿瘤的抑制作用：通过体内外研究了FAM96A对肿瘤细胞增殖的影响。在细胞水平我们研究了FAM96A对肿瘤细胞的生存的作用。然后使用Fam96a的基因敲除鼠和FAM96A转基因鼠进行了体内的荷瘤实验。通过敲减FAM96A稳定株进行了体内肿瘤转移的实验。.炎症：在体内外对FAM96A在炎症过程中的作用进行了研究。体外实验检测了Fam96a-/-小鼠腹腔巨噬细胞在LPS刺激后多种细胞因子和炎症相关分子的表达变化，体内利用结肠炎模型研究了FAM96A体内的作用，并进行了机制的研究。.重要结果：细胞水平没有发现FAM96A对肿瘤细胞具有明显的作用，但是体内实验结果表明FAM96A对肿瘤的生长具有明显的抑制作用，同时外周免疫器官发生了明显的变化，提示FAM96A对肿瘤的抑制作用是通过对免疫功能的影响而发生的。体内实验发现敲减了FAM96A后肿瘤细胞更容易发生转移和成瘤。FAM96A对炎症的作用体内外实验都得到了证实。细胞水平FAM96A可以抑制炎症反应，体内在老鼠急性结肠炎模型中FAM96A明显的抑制炎症反应，FAM96A重组蛋白在体内也具有同样功能。以上发现均申请了发明专利，第一个专利已经得到授权。. 科学意义：FAM96A的研究已经申请了国家发明专利，此项工作属于源头创新。分离鉴定具有我国自主知识产权和具有重要生物功能和开发前景的新基因，阐明其在生命活动过程中的表达调控规律，具有重要的理论和应用价值。