青蒿琥酯抑制LDLr-/-+Pristane小鼠树突细胞成熟调控TH17/Treg细胞平衡减缓SLE早发动脉粥样硬化的研究

Previously, we found the imbalance of TH17/Treg axis associated with the incidence and the onset of atherosclerosis (AS), which have an increased incidence in patients with systemic lupus erythematosus (SLE). When immature dendritic cells (iDC) develop into mature dendritic cells (mDC), it can activate T lymphocytes, depress Treg cells’ function and impede the development of immune tolerance. mDC were capable of secreting Interleukin-23 (IL-23), and the IL-23/IL-17 axis influences the progress of inflammation in SLE-AS system..Artesunate manages to up-regulate the gene and protein of FOXP3 and down-regulate the gene and protein of TRAF6, which restrain the release of IL-17, TNF- and inflammation factor in our former research. However, it remains unknown whether Artesunate can suppress the mature of DC and balance the TH17/Treg axis in order to decrease the incidence of SLE with AS. To understand its mechanism, we create the LDLr-/-+Pristane mice model of SLE combine with early AS, then we analyzed the alter levels of TH17/Treg axis and IL-23/IL-17 axis after Artesunate co-culture with DC by means of Flow cytometry instrument, ELISA and W-B in order to provide the theory evidence for the prevention and treatment of AS in patients with SLE.

我们既往发现TH17/Treg细胞失衡会导致免疫稳态失调从而导致SLE患者早发动脉粥样硬化，且证实iDC可诱导T细胞耐受而mDC则活化T细胞，抑制Treg细胞对T细胞的抑制作用，破坏免疫耐受的形成；同时mDC分泌IL-23，通过IL-23/IL-17轴通过促进炎症参与SLE-AS炎症的进展。在既往研究中我们证实青蒿琥酯通过上调Foxp3、下调TRAF6从而抑制IL-17、TNF-α及炎性因子释放。但青蒿琥酯能否抑制iDC极化转变为mDC，从而调控TH17/Treg细胞平衡减缓SLE患者早发动脉粥样硬化？为探讨其可能机制，我们拟建立SLE早发动脉粥样硬化LDLr-/-+Pristane小鼠模型，通过流式细胞仪、ELISA和W-B法检测青蒿琥酯极化树突细胞对IL-23/IL-17轴及TH17/Treg细胞平衡的影响并分析其可能机制，为青蒿琥酯预防及治疗SLE早发动脉粥样硬化提供理论依据。

虽然系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus ，SLE）患者的生存时间已经明 显延长，但许多远期及慢性并发症尤其是动脉粥样硬化（Atherosclerosis ，AS）所致心脑血管并发症明显影响患者预后.我们既往的研究发现SLE患者合并动脉粥样硬化高达12%（42/349），而发病年龄中位数为41.09±18.53。这也证实SLE患者不仅动脉粥样硬化发生率高，而且具有早发趋势.. 2012年起我们在国家自然科学基金的资助下（青蒿琥酯干预下TRAF6、Foxp3 在大鼠佐剂性关节炎滑膜细胞中表达的影响 ，81160376）对青蒿琥酯的抗炎和 免疫调节进行研究，发现青蒿琥酯动物实验上明显改善CIA大鼠的关节炎指数、 踝关节肿胀度，减少炎性因子释放，并调节Th17/Treg细胞的平衡，其能明显降 低CIA大鼠体内淋巴细胞中Th17亚群的比例，同时增加Treg亚群的比例，逆转Th17/Treg的失衡。并证实青蒿琥酯是通过调控T淋巴细胞信号通路Foxp3的表达及调控B淋巴细胞信号通路TRAF6的表达从而抑制炎性细胞因子释放。临床研究显示其可改善RA患者的症状及体征且副作用罕见。推测青蒿琥酯有可能代替羟氯喹作为一种预防及减缓SLE患者并发早发及高发动脉粥样硬化的药物。故此，我们拟在动物实验进行相关研究并探讨其可能机制。. 本研究建立SLE早发动脉粥样硬化LDLr-/-+Pristane小鼠模型，通过流式细胞仪、ELISA和W-B法、免疫组化检测发现青蒿琥酯能够有效减少模型鼠免疫球蛋白IgG的产生，增加体内补体C3的生成，也可以减少模型鼠IL17的释放，提高FOXP3的分泌，从而改善Th17/Treg细胞比例的失衡，减缓造模鼠体内的免疫炎症反应，20mg/kg青蒿琥酯效果最佳.并在细胞水平上证实了青蒿琥酯抑制iDC极化转变为mDC，并且能够有效抑制树突细胞炎症因子IL12的分泌，减少树突细胞IL17、TLR4、MYD88的表达，增强FOXP3的表达，从而调控TH17/Treg 细胞平衡减缓SLE患者早发动脉粥样硬化。