膜结合型HSP70诱导髓源抑制性细胞活化的分子机制

Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs)-mediated immune escape may be the main reason for poor efficacy of kidney cancer therapy, however, the mechanism about the amplication and activation of MDSCs is unclear. The preliminary study found that: renal cell carcinoma-derived Exosomes highly express membrane-bound HSP70 (E-HSP70) and load kidney cancer specific antigen; Breast cancer-derived Exosomes can induce significantly increased number of MDSCs in peripheral blood; MyD88-dependent signal transduction p pathway layed an important in the amplification of activation of MDSCs; HSP70 could induce a variety of cell activation through TOLL-like receptors. Therefore, this study aims to explore whether Exosomes induce MDSCs amplification and activation by the E-HSP70 signal pathway? Whether E-HSP70 induces the amplified and activation of MDSCs through TLR/MyD88 signaling pathway mitogen pathway and NF-кB pathway? Whether these phenomenons reduce antitumor effect, result in kidney cancer immune escape. This research may provide a new mechanism for kidney cancer immune escape and provide a alternative treatment option for renal cell carcinoma immune therapy .

髓源抑制性细胞（MDSCs）介导的免疫逃逸可能是肾癌免疫疗效欠佳的主要原因，但诱导其扩增活化的机制尚不清楚。前期研究发现：肾癌源性Exosomes高表达膜结合型HSP70（E-HSP70）及负载肾癌特异性抗原；乳腺癌源性Exosomes可诱导外周血MDSCs数量明显增多的现象；MyD88依赖性信号转导途径在MDSCs的扩增活化过程中伴有重要的作用；HSP70可通过TOLL样受体诱导多种细胞活化。基于上述研究，本研究旨在探讨Exosomes是否通过E-HSP70诱导MDSCs的扩增及活化，E-HSP70是否通过TLR/MyD88信号通路经丝裂原途径及NF-кB途径诱导MDSCs的扩增活化，进而降低抗肿瘤免疫效应，导致肾癌免疫逃逸。通过该项研究可能为肾癌免疫逃逸的探索出新的机制,并为肾癌的免疫治疗提供新的思路。

肾癌被认为是少数几种具有免疫原性的肿瘤，免疫治疗是转移性肾癌主要的治疗方式，但是，白介素2和干扰素应用于临床治疗肾癌超过20年的时间，其远期疗效有限。目前研究认为，髓源抑制性细胞（MDSCs）介导的免疫逃逸可能是肾癌免疫疗效欠佳的主要原因，但诱导其扩增活化的机制尚不清楚。因此，探索肾癌的免疫逃逸机制一直是肾癌迫切需要解决的关键论题之一。.本课题围绕肾癌源性Exosomes来源的膜结合的HSP70（简称E-HSP70）①E-HSP70是否介导了小鼠骨髓MDSCs的扩增、活化及外周募集；②E-HSP70是否通过TLR/MyD88信号通路经丝裂原途径及NF-кB途径诱导MDSCs的扩增、活化，再用抗HSP70抗体阻断膜结合HSP70与TOLL样受体的结合，检查下游信号分子的表达；③体外实验检测E-HSP70诱导活化的MDSCs对T淋巴细胞的抑制作用是否具有抗原特异性，三个方面进行研究探索。结果显示：①肾癌源性Exosomes高表达多种免疫共刺激分子HSP70、 ICAM-1及G250抗原，明显促进了小鼠骨髓MDSCs的扩增、活化及在脾脏及外周血中募集，同时，在外周血中检测发现IL-6和VEGF的表达也明显上调；②在对E-HSP70诱导MDSCs的扩增、活化的分子机制研究发现：E-HSP70是通过TLR2/MyD88/TRAF6/p38/AP-1信号通路经丝裂原途径和Stat3途径诱导MDSCs的扩增、活化；③在关于E-HSP70诱导活化的MDSCs对T淋巴细胞的抑制作用是否具有抗原特异性的实验研究中，由于MDSCs体外培养存活不长给实验带来了一定困难，目前这部分实验尚未结束，课题组正积极优化实验条件，计划在2017年年中完成。.课题在完成期间已经发表论文5篇，其中SCI3篇，CSCD2篇，培养博士研究生1名，硕士研究生3名。课题部分实验内容参与科技进步评选，获得重庆卫计委科技进步一等奖1项。课题完成期间，可再撰写SCI论文1篇，预计影响因子在5分左右，CSCD论文1-2篇，正培养硕士研究生2名。