穿山龙总皂苷双重调控痛风性关节炎 "NALP3炎性体-SLCs尿酸转运体"的分子机制研究

痛风性关节炎(GA)近年来呈高发趋势，但其病理机制尚未明确且无理想的治疗药物。本课题针对其血液尿酸增高和关节炎症两大方面的病理特点，首次引入在GA的发生、发展过程中发挥关键作用的NALP3炎性体，并选择在尿酸转运中起主要作用的五大转运体为研究对象，进行穿山龙总皂苷的干预研究。前期研究表明穿山龙具有抗炎、镇痛、降尿酸等多种效应，故本课题进一步探讨穿山龙总皂苷双重调控GA"NALP3炎性体-SLCs尿酸转运体"的分子机制，分别通过RT-PCR 和WB法检测NALP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-8及SLCs系列尿酸转运体的mRNA和蛋白表达水平，阐明穿山龙总皂苷对其的干预机制。另外采取体内外实验相结合，从抗炎和降尿酸两大方面诠释穿山龙总皂苷治疗痛风性关节炎的一般作用机制。通过本课题的研究，不仅可为穿山龙总皂苷开发为创新型有效的抗GA的药物奠定基础，更可为GA找到新的治疗靶点。

痛风是由于高尿酸血症患者体液中的微晶型尿酸单钠盐或尿酸沉积导致的。具有一系列由于该原因导致疾病的共同临床特征，包括：急性关节炎、腱鞘炎、滑液囊炎、蜂窝组织炎、痛风石沉积、肾脏疾病和尿石症。高尿酸血症（血尿酸浓度>416µmol/L）是痛风的重要生化基础。约80-90%的痛风患者同时患高尿酸血症。近年，痛风性关节炎发病率呈现高发趋势，而且病理机制尚未完全明确。又由于痛风性关节炎的多发症状，即随病程的发展，症状也有很大差别。尚缺乏理想的治疗药物。随着对痛风性关节炎发病机制的逐渐明晰，发现有两类重要的分子机制参与了痛风性关节炎的发病过程。其一为控制尿酸浓度的“尿酸转运体”，尿酸转运体为控制尿酸盐重吸收与排泄的主要蛋白分子。另一类为参与痛风性关节炎炎症反应的NALP3炎性体。因此，本课题围绕这两类重要的分子机制展开临床中确有疗效的中药单味药穿山龙总皂苷的干预作用研究。.主要内容为穿山龙总皂苷治疗痛风性关节炎的一般作用机制；穿山龙总皂苷干预痛风性关节炎动物模型中NALP3炎性体的分子研究；穿山龙总皂苷干预高尿酸血症动物模型中SLCs尿酸转运体的分子研究。.结果表明，穿山龙总皂苷可降低血液XOD和 ADA活性，说明其可通过降低尿酸合成达到降尿酸的目的；穿山龙总皂苷可降低血液肌酐值，提高尿液肌酐值，证明其对于肾脏具有一定保护作用；穿山龙总皂苷可提高尿酸排泄分数，通过下调mURAT1和mGLUT9的mRNA和蛋白的表达，上调mOAT1和mOAT3的mRNA和蛋白表达达到促进尿酸排泄的目的；穿山龙总皂苷能够降低β-半乳糖苷酶活性、β-N-乙酰氨基葡萄糖酶活性、β-葡萄糖醛酸酶活性和酸性磷酸酶活性，说明其可降低溶酶体酶活性；穿山龙总皂苷可提高谷胱甘肽过氧化物酶和总超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛活性，可见其具有提高抗氧化能力；穿山龙总皂苷可降低血液中TNF-α、IL-1β与IL-8含量，即通过降低炎性因子的含量治疗痛风性关节炎；穿山龙总皂苷对人多形核白细胞具有保护作用，与模型组相比，可降低β-葡萄糖醛酸酶和乳酸脱氢酶的渗出率。穿山龙总皂苷可提高外周血单个核细胞中rCaspase1、rASC和rNALP3的mRNA和蛋白表达水平，可通过对NALP3炎性体的表达调控起治疗痛风性关节炎作用。.本研究诠释了穿山龙总皂苷干预痛风性关节炎的一般作用机制。从而为将其开发为新药提供了药理学方面的依据。