TRIM59在巨噬细胞直接接触杀伤肿瘤效应中的作用及机制研究

BCG-activated macrophages (MΦ) have anti-tumor effect via cell-cell contact，especially on sarcoma cells. After blocking the currently known direct killing factors, the tumoricidal activities still exist, which indicates that new surface effector molecules involve in the activated MΦ. TRIM59 was a specific up-regulated membrane protein expressed on the surface of BCG-activated MΦ. We have found that killing activities of MΦ via cell-cell contact decreased after treated with anti-TRIM59 antibody. Current papers showed that the expression of TRIM59 in sarcoma and epithelial tumors was significantly different. Together with the tumoricidal sensitivity of MΦ via cell-cell contact, this indicates that TRIM59 has an important role in monitoring certain tumors. In order to study the effect and mechanism of Trim59 in tumoricidal activities of macrophages via cell-cell contact, this project intends to use TRIM59 conditional knockout mice and sarcoma models to explore the role of TRIM59 in direct cytotoxic effect of MΦ and analyze its regulation activities in MΦ and their associated signaling pathways. Then we will screen the corresponding receptors of TRIM59 and analze the effect of TRIM59 and its receptor on tumor cell growth. This subject can provides a whole new line of research for revealing the mechanism of anti-tumor effector molecules of MΦ, and lays the foundation for the development of new anticancer drugs.

BCG激活的巨噬细胞（MΦ）具有直接接触杀伤肿瘤的作用，尤以肉瘤细胞作用显著。封闭了目前已知的直接杀伤因子外，其杀伤作用依然存在，说明MΦ表面存在新的效应分子。TRIM59为BCG活化MΦ后特异上调表达的膜蛋白，利用抗体封闭该蛋白后，MΦ杀伤作用明显减弱。目前文献显示TRIM59在肉瘤和上皮肿瘤中表达量明显不同，再结合MΦ直接接触杀伤肿瘤的敏感性，说明该蛋白在MΦ对某些肿瘤的监视中具有重要的作用。为深入研究TRIM59在MΦ的杀伤效应中的作用及机制，本课题拟利用TRIM59条件性基因敲除鼠以及肿瘤模型，探讨TRIM59在MΦ的直接杀伤效应中的作用及方式，并分析TRIM59对MΦ自身的调节作用以及相关信号通路；筛选肿瘤细胞上相应的受体，检测两者结合后对肿瘤细胞生长的影响。本课题为揭示MΦ杀伤肿瘤的效应分子的鉴定及其杀伤机制提供了一条全新的研究路线，并且为新型抗肿瘤药物的研发奠定基础。

BCG激活的巨噬细胞（MΦ）具有直接接触杀伤肿瘤的作用，尤以肉瘤细胞作用显著。目前文献显示TRIM59在肉瘤和上皮肿瘤中表达量明显不同，再结合MΦ直接接触杀伤肿瘤的敏感性，说明该蛋白在MΦ对某些肿瘤的监视中具有重要的作用。为深入研究TRIM59在MΦ的杀伤效应中的作用及机制，本课题拟利用TRIM59条件性基因敲除鼠以及肿瘤模型，探讨TRIM59在MΦ的直接杀伤效应中的作用及方式，并分析TRIM59对MΦ自身的调节作用以及相关信号通路。目前结果表明BCG通过TLR2和TLR4直接作用于巨噬细胞引起TRIM59的表达，并且是通过IRF5信号通路实现的。同时，我们进一步观察到TRIM59在巨噬细胞膜表面表达，并且参与巨噬细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用，然而对不同类型肿瘤其杀伤作用存在差异。我们发现TRIM59对巨噬细胞具有一定的调控作用。TRIM59在RAW264.7细胞中的表达水平发生变化时，巨噬细胞生长周期、表面标志分子、细胞因子分泌、吞噬功能都有一定的改变。并且，我们通过转录组测序技术研究了TRIM59对RAW264.7细胞基因表达的影响，结果表明TRIM59影响了巨噬细胞的多种基因。为了研究TRIM59在体内的作用，我们利用TRIM59条件性基因敲除鼠进行研究，结果表明巨噬细胞中的TRIM59对MCA207纤维肉瘤和B16黑色素瘤具有抗肿瘤的作用，其中巨噬细胞通过与肿瘤细胞直接接触杀伤MCA207肿瘤，另一方面巨噬细胞可能通过分泌细胞因子促进对B16肿瘤的杀伤作用。本课题为揭示MΦ杀伤肿瘤的效应分子的鉴定及其杀伤机制提供了一条全新的研究路线，并且为新型抗肿瘤药物的研发奠定基础。