葡萄中以白藜芦醇为底物的代谢酶分离及其表达特性研究

白藜芦醇具有预防心血管疾病的功效，是葡萄与葡萄酒中重要功能因子。它的合成源于苯丙氨酸代谢，但其后的转化、代谢仍是空白。因此，本研究以葡萄中诱导产生的白藜芦醇为起点，利用柱层析技术分离鉴定一个以白藜芦醇为底物的代谢酶、以超临界流体萃取和高效逆流色谱技术分离纯化其产物，以此查明白藜芦醇合成后的代谢途径，并对分离得到的代谢酶进行氨基酸测序，以WesternBlot技术分析葡萄诱导前后该酶的有无和含量，以Norther杂交方法确定该酶的基因表达特性，分别在蛋白和RNA水平上研究该代谢酶的表达特性。研究成果将首次查明白藜芦醇合成后的代谢途径和代谢酶，并确定该代谢酶在葡萄白藜芦醇诱导合成后的表达、调控情况和催化特性，为进一步寻求白藜芦醇诱导后的代谢调控技术、阻断白藜芦醇的代谢转化、进而为它在葡萄与葡萄酒中的高效富集提供方法和依据。