循环纤维细胞通过IL-18/DARC抑制创面血管新生及其机理研究

Angiogenesis is the basis of wound healing, and it is involved in a variety of diseases such as tumor growth, rheumatism, and ischemic heart disease occurrence and development, but the mechanism is not clear. The early stage of the project research shows that CFs can inhibit angiogenesis, and slow wound healing rate. After trained CFs and VECs, the expression of IL-18 in CFs and DARC in VECs increased significantly, and using IL-18 RNAi on CFs can reduce the expression of DARC in VECs. In view of the role of CFs can inhibit angiogenesis, Our project team put forward the following hypothesis: CFs regulate VECs through IL-18 thus inhibiting angiogenesis. To test the hypothesis, we will build the expression and inhibiting adenovirus, and using immunofluorescence, western-blot, realtime-PCR, and FCM to clear the regulating effect and the signaling transduction mechanism of IL-18 to DARC in VECs. Then we will conduct further validation in vivo. The project will further revealed the regulating effect of CFs to angiogenesis, and it is expected to provide new drug targets and ideas for the treatment of surgery wound and angiogenesis related diseases.

血管新生是创面愈合的基础，血管新生还参与了肿瘤生长，风湿病，缺血性心脏病等多种疾病的发生和发展，但机制不清。项目组前期研究结果显示，CFs能够抑制血管新生，并减缓创面愈合速率。体外CFs与VECs共培养后，CFs内IL-18和VECs内DARC表达明显增高，在CFs采用IL-18 RNAi可下调VECs内DARC的表达。鉴于DARC具有抑制血管新生的作用，项目组提出如下科学假设：CFs通过IL-18调控DARC进而抑制血管新生。为验证这一假设，项目组构建IL-18过表达和抑制腺病毒，采用免疫荧光、Western-blot、Realtime-PCR、流式细胞仪检测等方法，明确CFs内IL-18对VECs内DARC的调控作用及其信号转导机制，并在体内进行进一步的验证。本项目将进一步揭示CFs对血管新生的调控机制，有望为外科学创面的治疗以及血管新生相关疾病的治疗提供新的药物作用靶点和思路。

血管新生是创面愈合的基础，新生血管还参与了肿瘤生长，风湿病，缺血性心脏病等多种疾病的发生和发展，但机制不清。项目组前期研究结果发现，CFs能够抑制血管新生，并减缓创面愈合速率。体外CFs与VECs共培养后，CFs内IL-18和VECs内DARC表达显著增高，在CFs采用IL-18 RNAi可下调VECs内DARC的表达。在此基础上，本项目对其作用机制进行了进一步的深入研究。我们明确了CFs内IL-18对VECs体外细胞生物学行为的影响，即CFs通过IL-18在转录水平与翻译水平均显著促进了VECs内DARC的表达，并通过激活NFkB通路上调VECs内DARC，从而抑制了VECs的增殖及迁移，减弱了细胞间连接，同时促进了VECs的早期凋亡，最终导致血管新生受到抑制。同时，体内动物实验结果显示，IL-18通过抑制血管新生从而对创面愈合具有显著的抑制作用。本课题为创面愈合的治疗以及血管新生相关疾病提供了新的思路，由于CFs对体内血管新生的显著抑制作用，我们可以考虑将CFs作为体内的药物靶点，从而制备血管新生相关疾病的药物。这一结果具有十分重要的意义。