创面愈合过程中新生血管周细胞来源及分化机理研究

血管新生是创面愈合的重要内容，新生毛细血管不是单纯的内皮细胞管，而是依赖于周细胞（pericytes）的包裹才能结构稳定和功能正常。目前创面愈合过程中周细胞的来源、分化机制尚未阐明。本课题的初步研究结果证明，外周血纤维细胞（PBFCs）可能是创面新生血管中周细胞的来源之一。在此基础上，拟首先采用免疫磁珠技术从BALB－C雄性小鼠血液中分离含有Y染色体的外周血纤维细胞，注入雌性小鼠血液循环后，联合免疫荧光双标记和免疫电镜胶体金双标记技术，观察小鼠急性创面新生血管中周细胞内是否含有Y染色体，进一步获取外周血纤维细胞向新生血管迁移并分化为周细胞的最有力证据。然后将外周血纤维细胞与血管内皮细胞在Transwell室共培养,用基因芯片技术研究外周血纤维细胞向周细胞分化过程中mRNA基因表达谱的差异，筛选相关基因。采用RNA干扰技术，在体内、外模型中研究经筛选基因对周细胞分化的作用，寻找功能基因。