血管糜酶活性与AS斑块易损性关系的实验研究

血管糜酶可能是影响AS斑块稳定性的重要因素。课题申请者曾在国际上首先建立了在体干预糜酶活性的AS仓鼠模型，并初步验证了干预糜酶活性可以影响AS斑块稳定性这一假说。然而，由于以往研究中缺乏特异性糜酶激活剂或抑制剂，无法排除干扰因素的影响。因此证实该假说尚缺乏更直接的证据。同时，ARB或肥大细胞稳定剂可否代替糜酶抑制剂的作用国际上尚未见报道。本研究以AS仓鼠为研究对象，拟从分子水平在体调节AS仓鼠血管糜酶的基因表达，设立转染携带糜酶基因的腺病毒表达载体的基因过表达以及转染携带SiRNA的慢病毒载体进行基因沉默治疗的亚组，并同时设立局部血管肥大细胞激活、ARB治疗及曲尼司特治疗的亚组，通过对照研究亚组间斑块破裂或易损指数等指标的变化，旨在阐明在体干预糜酶活性对AS斑块的直接影响，并分析ARB或肥大细胞稳定剂可否代替糜酶抑制剂，深入探讨稳定斑块的新靶点，具有重要的学术理论意义和潜在的临床应用价值。

糜酶活性被证实与斑块易损指数密切相关，在仓鼠动脉粥硬化模型中用糜酶抑制剂证实。考虑到糜酶抑制剂都不特异，在本基金的支持下，我们深入研究了糜酶在动脉粥硬化中的作用。首先我们成功构建了含有糜酶小发夹干扰RNA的慢病毒或过表达糜酶的慢病毒载体，微静脉注射小鼠之后，我们检测相关指标的变化。结果显示用小发夹干扰RNA沉默糜酶显著的增强了动脉粥硬化的斑块稳定性，没有改变体重或是血清脂质水平。过表达的糜酶促进了仓鼠斑块中的易损斑块的形成。深入的机制研究发现，糜蛋白酶具有激活金属基质蛋白酶9的功能，在动脉粥样硬化损伤中，由此导致斑块不稳定。阐明在体干预糜酶对动脉粥样硬化斑块稳定性的直接影响，深入探讨稳定斑块的新靶点，具有重要的学术理论意义和潜在的临床应用价值。.在本基金资助下，发表SCI收录论文4篇：培养博士研究生3名。