三江源地区“水陆空”源棘球绦虫虫卵污染情况调查及感染风险评估

The infection rate of hydatid disease in human and animals is still very high in Three-River Source Region of the Qinghai-Tibetan plateau, and the intermediate hosts become infected by ingesting water or/and food contaminated with Echinococcus spp. eggs, which is seriously endangering the safety and health of the hosts. At present, there aren’t few reports about the pollution situation and infection risk of Echinococcus spp. eggs from the water-borne samples (river, swamps and lakes water), land-derived samples (soil, feces and the dust on the surface of fruits, vegetables and plants), and air-borne samples (dust aerosols). In this study, the Real-Time PCR molecular method is used to investigate the contamination rate of eggs form the “water-land-air” three-dimensional environments, and the Nested-PCR method is used to amplify the genes and to analyze the main epidemic strains of Echinococcus spp. and genotypes and gene polymorphisms, then it is determined if there is an assumption that Echinococcus spp. eggs transferring among the “water-land-air”. To identify the possible scenes of Echinococcus spp. eggs infection risk, to determine the weighting coefficient of each environmental and the probability of each influencing factor, all these are used for establishing and evaluating the risk analysis method of Echinococcus spp. eggs infection. This study has suggestive roles of infection risk for people's production and living activities, animals husbandry and tourism in Three-River Source Region, it will provide information for the epidemic prevention and control work of hydatid disease, there is also being of great practical significance to establish the scientific risk assessment.

三江源地区人和动物的包虫病感染率一直很高，各中间宿主因误饮食虫卵而感染，严重危害宿主的安全健康。目前，对水源性样品（河流、沼泽及湖泊水）、陆源性样品（土壤、粪污物以及果蔬植被表面的尘土）和空源性样品（粉尘气溶胶）中棘球绦虫虫卵的污染情况及感染风险未见报道。本研究以“水陆空”源三维环境中虫卵为研究对象，采用Real-Time PCR方法对各环境中的虫卵污染率进行本底调查研究，利用巢氏PCR方法扩增已检阳性样品，基因测序后，利用生物信息方法分析本地区棘球绦虫主要流行株及其基因型和基因多态性，确定是否存在虫卵于“水陆空”三维间传播转移假设。确定虫卵感染风险发生的可能场景，确定各环境因素权重系数与各影响因素的概率，对虫卵感染风险进行评估。这对本地区人们的生活生产活动、畜牧业和旅游业等感染风险具有提示作用，为本地区包虫病的流行防控工作提供信息依据，进行风险评估具有重要的现实意义。

包虫病是由棘球属绦虫中绦期幼虫棘球蚴引起的一种重要的人兽共患寄生虫病。三江源地区是青藏高原上棘球绦虫发生流行最严重的地区之一，主要包括多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫和石渠棘球绦虫。棘球绦虫的终末宿主一般为狐狸、犬和狼等犬科动物，终末宿主排出粪便时，虫卵就会随粪便一起排出体外而污染土壤、水源等，对中间宿主造成威胁。为了探究三江源地区水源、土壤和粪便中棘球绦虫虫卵污染情况，摸清三江源地区虫卵感染环境因素和感染风险程度本底状况，建立风险评估体系来指导人和动物相关的防疫预防工作。.本研究建立了适用于不同层次的实验室检测三种棘球绦虫的PCR分子检测方法，包括多重PCR方法（mPCR）、重组酶介导的多重核酸等温扩增检测方法（mRAA）和多重荧光实时定量PCR检测方法（mqPCR），其中mPCR的灵敏度为1000个拷贝/μL，mRAA的灵敏度为200个拷贝/μL，mqPCR的灵敏度为10个拷贝/μL；均能特异性地检测相应的棘球绦虫。.利用灵敏度最高的多重荧光实时定量PCR检测方法对三江源地区的犬科动物（犬和狐狸）粪便、土壤和水源样本中棘球绦虫虫卵污染情况进行流行病学调查，结果显示，三种类型的样本中均检测到三种棘球绦虫，但不存在混合感染；粪便样本中棘球绦虫的总流行率为6.84%（46/673），其中犬的棘球绦虫感染率为5.81%（19/327），狐狸的棘球绦虫感染率为7.80%（27/346）；土壤样本的棘球绦虫虫卵总污染率为2.42%（10/414）；水源样本的棘球绦虫虫卵总污染率为3.68%（12/326），基因型及基因多态性较丰富，各个样本源的样本中存在相互转移传播的可能性。.综合分析棘球绦虫的流行病学数据，确定虫卵感染风险发生可能场景，计算感染发生的风险概率为0.199，风险等级为很可能不感染；确定危害程度影响因素发生可能场景，计算感染发生的风险概率为0.158，危害严重程度等级为较小；最后确定三江源地区棘球绦虫虫卵感染风险水平为低危险度风险。.通过对三江源地区各类型源样本携带虫卵传播风险分析，为三江源地区棘球蚴病的防控工作提供相关信息和决策依据。这对本地区人们的生产生活活动、畜牧业和旅游业等棘球绦虫感染风险具有提示作用，对该病的风险评估具有重要的现实意义。.