调控Wnt信号通路对特发性肺纤维化发生发展影响的研究

特发性肺纤维化（IPF）是一种病因不明，以肺间质纤维化为特征的疾病，其发病率高，治疗效果差，5年生存率仅有30%-50%。研究发现Wnt信号通路参与了IPF的发生，激活Wnt信号通路可促进肺干细胞向成纤维细胞分化，加快IPF进程。与此相反，我们的前期研究发现，抑制Wnt信号通路能够促进骨髓间充质干细胞向上皮细胞分化，提示研究Wnt信号通路调节可能为探讨IPF发生的分子机制及临床治疗，提供新思路。本项目在我们的前期工作基础上提出，以探讨特异Wnt信号通路调节为切入点，开展以下研究：①建立IPF动物模型及肺干细胞与肺泡上皮细胞共培养体系，进一步确认阻断Wnt信号通路也能有效地促进肺干细胞向肺泡上皮细胞分化；②筛选在肺干细胞向成纤维细胞分化过程中起关键作用的Wnt蛋白，寻找治疗特发性肺纤维化的关键靶点；③在IPF动物模型中证明选择性阻断特定Wnt信号通路有利抑制肺纤维化，促进肺泡上皮结构重建。

特发性肺纤维化（IPF）是一种病因不明，以肺间质纤维化为特征的疾病，其发病率高，治疗效果差，5年生存率仅有30%-50%。本项目研究了调控Wnt信号通路对IPF发生发展的影响。首先我们成功建立小鼠肺间质干细胞体外分离、纯化、培养体系，并在小鼠体外肺间质干细胞-肺泡上皮细胞共培养体系中，证明了Wnt信号通路参与肺间质干细胞的分化，调控Wnt信号通路能够决定肺间质干细胞的分化方向，即激活Wnt信号通路能够促进肺间质干细胞向成纤维细胞分化，抑制Wnt信号通路则促进肺间质干细胞向肺泡上皮细胞分化；然后，我们通过博来霉素气管喷雾技术建立小鼠IPF动物模型，证明了肺纤维化动物肺组织内Wnt信号通路处于过度激活状态，给予其Wnt信号通路广谱抑制剂，阻断Wnt信号通路，能够抑制肺纤维化的发生发展；接着，我们利用成纤维细胞转化因子（TGF）诱导小鼠肺间质干细胞向成纤维细胞分化，采用Affymetrix GeneChip Mouse Gene 1.0 ST Array基因芯片筛选出了在该分化过程中高表达的特定Wnt 蛋白，即Wnt5a、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt10a，并将以上结果在肺纤维化小鼠肺组织中予以确认；最后，我们选择Wnt8b为作用靶点，分别在小鼠肺间质干细胞向成纤维细胞分化体系以及博来霉素诱导小鼠IPF动物模型中，采用慢病毒分别上调、下调Wnt8b的表达，证明了抑制Wnt8b能够特异性抑制小鼠肺间质干细胞向成纤维细胞分化，同时能够有效抑制IPF小鼠肺纤维化的发生发展。研究成果以学术论文形式发表于SCI收录期刊9篇及国内核心期刊1篇。本研究旨在探明IPF发生发展的分子机制，寻找特异性抑制IPF发生的有效靶点，为临床治疗提供新思路。