芒果苷抗高尿酸血症作用及分子机制研究

高尿酸血症不仅是痛风最重要的生化基础，而且与代谢紊乱综合征各组分之间存在着密切的联系，已成为威胁人类健康的严重的代谢性疾病。然而，目前治疗药物却非常有限。本课题组首次发现来自芒果叶的一种天然产物芒果苷具有降低高尿酸血症小鼠血尿酸水平的作用，其降尿酸活性不亚于、甚至优于临床一线抗痛风药别嘌醇，而毒性却远远小于别嘌醇，小鼠灌胃给药的最大耐受量为20 g/kg，显示出高效、低毒的特点(已申请专利)。本研究将在前期研究的基础上进行系统深入的药效学及机制研究，探明其降尿酸作用的药效、量效和时效关系，并从抑制尿酸生成和促进尿酸排泄两个方面，利用细胞转染、RT-PCR、同位素标记、酶动力学测定等技术在细胞和分子水平探讨其可能的作用机制，并与别嘌醇和/或苯溴马隆进行比较研究，评价其成为治疗高尿酸血症的新型天然药物的可能性，为最终创制出具有我国自主知识产权的新药奠定基础。

本课题以天然产物芒果苷为研究对象，较系统的研究了芒果苷的降尿酸活性，并重点从抑制尿酸生成的角度探讨其作用机制。结果表明芒果苷(1.5、3.0、6.0 mg/kg)灌胃给药剂量依赖性地降低氧嗪酸钾诱导的急性高尿酸血症小鼠和慢性高尿酸血症大鼠的血尿酸水平，起效时间快于苯溴马隆，与别嘌醇类似，降尿酸作用的效价按等摩尔剂量比较，芒果苷的作用弱于别嘌醇，与苯溴马隆相当；在有效治疗剂量下不影响正常小鼠的血尿酸水平，剂量高达100 mg/kg 时才能降低正常小鼠的血尿酸水平。机制研究表明芒果苷体外对尿酸生成的关键酶黄嘌呤氧化酶的活性没有明显抑制作用，而其体内代谢产物芒果苷元则能显著抑制黄嘌呤氧化酶的活性，其IC50为7.8 uM，提示代谢产物芒果苷元可能是芒果苷降尿酸作用的活性代谢产物；体内降尿酸作用的对比研究结果表明等摩尔剂量的芒果苷和芒果苷元灌胃给药后，其降低高尿酸血症小鼠血尿酸作用的效价相当，进一步证明了芒果苷元可能是芒果苷的活性形式。初步的构效关系研究表明芒果苷元2,3,6-位的羟基是发挥黄嘌呤氧化酶抑制作用的重要基团，其醚化将导致抑制活性降低或消失；而7-位为葡萄糖碳苷(芒果苷)，则抑制活性丧失，推测葡萄糖的空间位置可能阻隔了芒果苷与酶底物复合物的结合。芒果苷及其苷元对嘌呤代谢中的其它关键酶嘌呤核苷磷酸化酶活性没有明显影响，也不影响磷酸核糖焦磷酸合成酶、磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶、次黄嘌呤- 鸟嘌呤磷酸核糖转移酶的基因表达。此外，初步的芒果苷促尿酸排泄作用研究结果表明芒果苷对尿酸所致的高尿酸血症小鼠有明显的降尿酸作用，提示芒果苷能促进尿酸的排泄，其机制与下调URAT1的表达有关。