萆薢总皂苷防治高尿酸血症及对肾脏尿酸转运蛋白的调控作用

前期研究表明，萆薢牛膝总皂苷有显著降尿酸作用，其作用机制主要是促进尿酸排泄，抑制制黄嘌呤氧化酶活性也可能是其机制之一。组方合理性研究表明：萆薢总皂苷能降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平，而牛膝总皂苷无明显作用。本课题假设：萆薢总皂苷可能通过调节尿酸转运蛋白发挥降尿酸作用。本课题首先采用腺嘌呤+乙胺丁醇复制大鼠高尿酸血症（尿酸排泄减少型）模型、酵母粉饲喂复制鹌鹑高尿酸血症（尿酸产生增多型）模型，研究萆薢总皂苷对血尿酸、尿酸排泄、肾功能、尿酸转运蛋白（UAT、OAT1、OAT3、URAT1）表达，黄嘌呤氧化酶、腺苷脱氨酶等的作用，进一步在肾小管上皮细胞（HK-2）上研究萆薢总皂苷对正常或尿酸盐刺激后HK-2细胞OAT1和hUAT mRNA表达的影响。本课题的深入研究，为该药防治高尿酸血症提供新的思路和实验依据，并丰富中医药治疗高尿酸血症的理论。

高尿酸血症（Hyperuricemia，HUA）是痛风性关节炎和尿酸性肾损害的生化基础。尿酸在肾脏的排泄主要依赖于肾小管上皮细胞上的尿酸转运蛋白，即负责尿酸重吸收的尿酸转运体1(URAT1)，及负责尿酸分泌的有机阴离子转运体（OAT1和OAT3)等。萆薢总皂苷(total saponin of dioscorea，TSD)是从薯蓣科植物萆薢中提取的一类甾体总皂苷。本课题采用腺嘌呤+乙胺丁醇或氧嗪酸钾+乙胺丁醇复制大鼠慢性高尿酸血症（尿酸排泄减少型）模型、高钙高蛋白饲料饲喂复制鸡高尿酸血症（尿酸产生增多型）模型，研究TSD对血尿酸（SUA）、尿酸排泄、肾功能、尿酸转运蛋白（OAT1、OAT3、hURAT1）及hURAT1 mRNA表达、黄嘌呤氧化酶（XOD）、腺苷脱氨酶（ADA）等的影响，采用Pearson相关分析，对SUA与尿酸排泄指标之间的相关性进行分析。进一步在人肾小管上皮细胞（HK-2）上研究TSD对尿酸盐刺激后HK-2细胞hURAT1、hUAT以及hOAT4 mRNA表达的影响。结果，TSD能剂量依赖性地降低HUA大鼠SUA水平，增加尿酸排泄，降低肾脏URAT1 mRNA和URAT1蛋白的高表达，增加OAT1、OAT3蛋白表达，作用与苯溴马隆相近。SUA水平与血肌酐（SCr）呈正相关，与尿酸清除率（CUr）、尿酸排泄分数（FEUA）、肌酐清除率（CCr）呈显著负相关性。TSD可显著下调尿酸钠诱导的HK2细胞hURAT1、hUAT以及hOAT4基因mRNA的高表达。TSD可显著降低HUA鸡的SUA水平，增加鸡的粪便尿酸排泄量；别嘌醇组、TSD高剂量组鸡的血XOD活性降低；苯溴马隆、别嘌醇、TSD对ADA、尿素氮和SCr水平无明显影响。表明TSD可显著促进尿酸排泄，有明显的抗高尿酸血症作用；FEUA和CUr是肾脏排泄尿酸的敏感指标。TSD可能通过抑制URAT1的高表达而减少尿酸的重吸收，同时上调OAT1、OAT3低表达，促进尿酸分泌。抑制XOD活性也可能是其作用机制之一。本课题的深入研究，为该药防治高尿酸血症提供新的思路和实验依据，并丰富中医药治疗高尿酸血症的理论。