本研究完成了对生长激素释放因子(GRF1—32)的基因改造,改变了5个氨基酸,并克隆到克隆质粒pBluescript。构建了GRF真核表达载体pcDNA3-GRF(1-32),用LIPOFECTIN将表达质粒转染到CHO细胞,用DOTBLOT和WESTERN BLOT检测到GRF基因的表达。用体外培养的单层大鼠垂体细胞测定表达产物的生物学活性,表明表达产物可以刺激GH的释放。用半乳糖苷化合物对多聚L-LTSINE进行半乳糖基化,间苯二酚法测定糖基含量。在不同氯化钠浓度下将表达质粒与半乳糖化的多聚L-LYSINE结合,电镜观察形成复合物的结构,发现在1.031mol/L形成合适的球形复合物。将该复合物静脉注到射家免体内,用RT—PCR和ELISA在25天时检测到了表达。注射后7天,GH增高67%
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数据更新时间:2023-05-31
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