利用生物发光技术进行结核杆菌快速药物敏感性试验

本课题研究了3株氟康唑（FCZ）耐药性白念株菌（包括通过诱变获得的白念株菌ATCC14053的5个FCZ耐药突变菌落）的耐药机制。根据唑类药物靶酶编码基因设计六对上下之间交叉重叠的引物，将长约1.8kb的目的基因分六段扩增出来，通过Southern杂交排除了所有受试菌株因靶酶编码基因缺失而耐药的可能。SSCP分析发现第六对引物的扩增产物系突变热点所在部位，且耐药株之间存在差异。将诱变后耐药菌株与诱变前的不耐药菌株进行比较也得到了类似的结果。选择3个代表片段克隆测序，共发现5个有意义突变位 点，而其中4个位于突变热点所在片段之内。因此认为：一个或一个以上部位一的基因突变造成了这些菌株对FCZ耐药现象的发生。