基于纳米金的高通量环境雌激素快速筛选技术研究

雌激素受体结合分析是重要的环境雌激素筛选试验，是美国EDSTAC首选的第一级环境内分泌干扰物筛选试验，本项目将利用纳米检测技术建立一种新的环境雌激素高通量快速筛选方法。该方法的基本原理是通过检测因环境雌激素干扰而未能与天然雌激素（17β－雌二醇）结合的雌激素受体(ER)来反映环境雌激素的量，未结合的ER量与环境雌激素的活性成比例关系。首先将17β-雌二醇固定于微孔板中，将待测样本与定量的ER混合后加入微孔板中，孵育后取上清（含有因环境雌激素干扰而未能与雌二醇结合的ER）,加入另一包被有ER抗体的微孔板中，使ER与抗体结合，后加入标有纳米金的雌激素受反应元件(ERE)探针（因ER与ERE结合不依赖于雌激素而采用竞争结合方式），洗涤后用银增强显色检测光密度。该方法的检测的灵敏度可提高2-3个数量级，简便易行，费用低，可在微孔板和芯片上进行，是一种高通量环境雌激素快速筛选方法。