基于气血互根的理论研究肾衰II号方干预慢性肾衰肾内氧耗效应的作用及机制

基于肾内缺氧调节损伤细胞能量代谢与NOS-1、AngII信号转导以促进肾间质纤维化的病理机制研究进展，在既往"肾衰II号方"抗慢性肾衰肾间质纤维化研究的基础上，根据中医学"气血互根互用"之理论，以及气虚、血虚、血瘀在肾脏缺血缺氧的重要作用，探讨益气补血化瘀为主"肾衰II号方"通过影响肾内氧耗效应以抗肾间质纤维化的作用机制。本课题拟大鼠5/6（A/I）肾切除慢性肾衰模型为研究对象，选择肾内氧耗调节药物-AngII阻滞剂为对照，采用Western blot与荧光定量RT-PCR等方法，从肾脏氧耗代谢、肾组织病理等角度，观察"肾衰II号方"对肾内氧耗与肾间质纤维化的作用特点；并基于NOS-1、AngII信号转导途径探讨该方干预肾内氧耗效应及肾纤维化的作用机理，阐明该方改善肾内氧耗抗肾间质纤维化的细胞分子药理机制，揭示中药干预组织氧耗与肾纤维化的重要线索，促进中医药防治慢性肾病基础理论的发展。

肾纤维化是慢性肾脏疾病（CKD）进展到后期的最终结果，其严重影响CKD的预后。肾脏缺氧已成为国际相关领域研究的热点。缺氧作为启动肾脏纤维化的根源，不仅损伤细胞的能量代谢，还可诱导相关特定基因（NOS-1、AngII 及HIF-1α）的蛋白表达和影响细胞功能，是导致肾脏纤维化发生和发展的重要机制之一。既往研究证实，肾衰II号方具有降低肾毒素、减轻肾小球硬化程度、减少肾小管间质纤维化损伤效应，可在一定程度上延缓慢性肾病的进程，本项目基于CKD生理、病理变化以及中医学“气血互根互用” 之理论，围绕肾内缺氧所诱导的关键病理环节，拟大鼠5/6（A/I）肾切除慢性肾衰模型为研究对象，选择肾内氧耗调节药物—AngII阻滞剂为对照，观察肾衰II号方对肾内氧耗与肾间质纤维化的作用特点；深入探讨肾衰II号方是否通过多靶点、多途径干预肾内氧耗效应及抗肾纤维化的作用，阐明该方改善肾内氧耗抗肾间质纤维化的细胞分子药理机制，揭示中药干预肾组织氧耗与纤维化的重要线索。. 研究发现，5/6（A/I）慢性肾衰大鼠病理特点与肾衰II号方干预肾纤维化作用特征：①肾纤维化肾功能与肾组织肾内氧耗有着密切联系。②5/6（A/I）慢性肾衰大鼠残余肾内氧耗（QO2/TNa）增加，肾静脉的氧分压 (RVpO2)显著降低。③肾纤维化肾组织特定AngII和HIF-1α蛋白过度表达，nNOS蛋白过低表达等信号通路异常病理机制。④肾衰II号方具有减少肾内氧耗，提高RVpO2，改善肾组织氧合微环境；下调AngII、HIF-1α蛋白表达及上调nNOS蛋白表达。⑤选择5/6（A/I）肾衰模型，该模型更类似人类慢性肾脏病肾脏血流动力学影响（AngII诱导）进展到慢性肾衰的过程，基于国内很少运用该模型，为后续对慢性肾衰发病机理研究工作的开展提供了保障。⑥缺氧导致肾纤维化与中医“气血互根互用”的理论之间的密切联系，诠释肾间质纤维化“气虚、血虚、血瘀”及“气血以流通为贵”中医理论的科学内涵。. 研究论证肾衰II号方改善慢性肾衰肾纤维化的独特作用机制，为临床防治CKD提供坚实的科学依据，为中医药调整CKD肾间质氧代谢，抑制肾纤维化提供新的思路与方法，肾衰II号方有利于延缓CKD向终末期肾病的进展速度，改善CKD的进展预后，有利于广大早、中期慢性肾衰患者，对促进中医药防治慢性肾脏病基础理论的发展，具有重要的临床指导意义。