针对复发肝癌细胞制备的抗体所识别细胞的恶性生物学特性及调控机制

肿瘤起始细胞可能是肿瘤产生、复发转移和治疗失败的根本原因，但由于所发现的标志物大多缺少特异性，该领域的研究一直饱受争议。我们建立了来源于同一肝癌病人原发灶（Hep-11）和复发灶(Hep-12)细胞系，通过群体和克隆实验证明Hep-12多数具有肝癌起始细胞特点，Hep-11则不致瘤,它们为研究肝癌复发以及肿瘤起始细胞提供了良好模型。用Hep-12细胞免疫小鼠，制备得到的抗体1B50-1初步结果表明可识别高致瘤性肝癌细胞，在动物实验中具有抑制多种肝癌细胞生长作用。本课题拟对1B50-1抗体阳性的肝癌细胞的恶性生物学特性及其调控的分子机制、该抗体所识别的抗原、作用的特点和机制以及与肝癌复发的关系进行探讨研究，以明确其是否可作为肝癌起始细胞的标志物，为寻找肝癌复发的细胞学基础和调控的分子机制提供线索，并有望为肝癌的治疗提供新靶点。

肝癌治疗后复发率高达70%，然而引起复发的细胞学基础不清，更缺少针对肝癌复发的治疗药物。1B50-1是我们前期利用自主建立的来源于同一病人原发和复发的肝癌细胞对Hep-11和Hep-12，通过全细胞免疫的方法制备获得的一个针对来源于复发肝癌Hep-12细胞的鼠源单克隆抗体。本课题对对1B50-1 抗体阳性的肝癌细胞的恶性生物学特性及其调控的分子机制、该抗体所识别的抗原、作用的特点和机制以及与肝癌复发的关系进行探讨研究。研究结果表明该抗体识别的抗原是电压依赖性钙通道的α2δ1亚基（亚型5），该抗体反应阳性的细胞具有肿瘤干细胞特性（具自我更新能力、强致瘤性、高表达与干细胞相关的基因以及具有分化形成1B50-1阳性和阴性细胞的潜能），且这些细胞在手术切缘组织的检出可以预测病人的复发和预后，因而是肝癌复发的起源细胞。此外，1B50-1抗体具有清除肝肿瘤干细胞作用在肝癌的治疗中有持久的效果（撤药后肿瘤未显著反弹）功能实验结果表明α2δ1通过调控钙信号在肝肿瘤干细胞恶性生物学特性的建立和维持中发挥重要作用。上述结果表明α2δ1是肝癌干细胞的功能性标志物和治疗靶点。本工作从细胞和分子水平揭示了肝癌复发的机制，为肝癌预后判断和治疗药物研制奠定了基础。该课题在Cancer Cell等SCI收录杂志发表论文4篇，已申请欧盟37国及美国、日本等另外5国的国际专利1项。