谷氨酸对类胰岛素生长因子-1促存活功能的作用及机制研究

谷氨酸兴奋性毒性所致的神经元死亡和多种神经系统疾病有关,但是, 谷氨酸兴奋性神经毒性和生长因子促细胞存活的功能及相互的内在关系则不清楚。我们从培养的海马神经元实验结果发现谷氨酸抑制IGF-1受体酪氨酸磷酸化，干扰IGF-1受体促存活信号的转导而减弱IGF-1促细胞存活的作用。这些实验结果首次提示了谷氨酸能在受体水平通过抑制生长（存活）因子的促存活作用而引起神经毒性这一新机制。本项目拟以培养的海马神经元为细胞模型，采用免疫印迹, 免疫沉淀,体外激酶分析,酪氨酸磷酸化/IGF-1R酪氨酸残基磷酸化分析等现代的药理学和分子细胞生物学方法, 系统研究谷氨酸对类胰岛素生长因子（IGF-1）促存活功能的作用及其机制，并用脑室内注射等技术在体验证以上新机理，为更好防治脑损伤及神经退行性疾病提供更可靠的科学依据及理论基础。

谷氨酸兴奋性毒性所致的神经元死亡和多种神经系统疾病有关。但是, 谷氨酸兴奋性神经毒性和生长因子促细胞存活的功能及相互的内在关系则不清楚。本项目以培养的海马神经元等为细胞模型,采用免疫印迹(Western blot), 免疫沉淀,体外激酶分析(in vitro kinase assay),和酪氨酸磷酸化/IGF-1R酪氨酸残基磷酸化分析等现代的药理学和分子细胞生物学方法,糸统地研究了谷胺酸对类胰岛素生长因子（IGF-1）促存活功能的作用及其机制。 结果发现在培养的神经元，谷氨酸能干扰IGF-1受体酪氨酸的磷酸化而抑制其下游存活通路及IGF-1的促存活作用。谷氨酸抑制除TY950位点外多个IGF-1受体的酪氨酸残基磷酸化。进一步实验发现谷氨酸对IGF-1受体的负性作用是由NMDA受体介导的。使用NMDA各型亚基的抑制剂及siRNA的实验进一步证明谷氨酸的作用是由NR2B介导的。谷氨酸脑室内注射及小鼠中动脉缺血再灌注模型也有类似的作用。这些结果证明谷氨酸不但能在细胞模型而且在动物体内也能抑制IGF-1受体磷酸化。我们的这些发现提示并支持谷氨酸能在受体水平通过抑制生长因子（存活）的促存活作用而引起神经毒性这一机制.