转化生长因子β1促肝星状细胞活化对血管生成作用的机制研究

慢性肝病过程中肝星状细胞（HSC）处于坏死炎症、病理性血管生成和纤维化过程中受低氧敏感性调节、细胞调节、化学调节的交叉点。鉴于转化生长因子β1（TGF-β1）在肿瘤中对血管生成因子的调节及肝纤维化中促HSC活化功能，本课题拟从细胞及动物模型水平用基因静默、载体过表达及western blot等技术研究TGF-β1静默或过表达后HSC非活化与活化状态对血管生成影响，探索肝纤维化过程中TGF-β1促HSC活化对血管生成作用的机制、研究VEGF在肝纤维化血管生成中所起的作用，以及血管生成素家族各个成员对VEGF的协同/拮抗作用，阐明血管生成在肝纤维化形成过程中与HSC的作用关系，为寻找肝纤维化和肝癌的治疗靶点及有效干预措施提供新的视角。

TGF-β1是一种促纤维化因子，亦可介导肝纤维化过程中的血管生成。过氧化氢酶作为内源性抗氧化酶，具有改善肝纤维化的效果。本课题中我们观察了过氧化氢酶对 TGF--β1介导的肝纤维化血管生成的影响。结果显示：1.CCl4模型组大鼠肝脏病理损害严重，肝细胞明显脂肪变性，部分肝细胞出现气球样变性，肝小叶结构被破坏，肝小叶周围坏死明显，纤维组织增生并伴有假小叶形成。在CCl4模型大鼠的肝脏中α-SMA、 TGF-β1、VEGF、CD31、Ang-1、Tie-2表达增强；Catalase表达的减少。2．Catalase过表达可明显下调HSCs中α-SMA表达，抑制HSCs增殖及迁移，减少I型胶原及Ang-1分泌。3．TGF-β1过表达可显著下调Catalase的表达量并影响Catalase酶活性；抑制TGF-β1表达则可以明显上调Catalase的表达量及Catalase酶活性，若同时下调Catalase表达则可部分拮抗TGF-β1所致的上调作用，该作用在转录水平最为明显。4．下调TGF-β1可明显抑制CD31、VEGF、Ang-1、Tie-2 等促血管生成因子的表达，抑制HSC的增殖效率及迁移能力，有效减少HSC中I型胶原以及Ang-1的分泌；而同时下调Catalase表达则可部分抵消这种抑制作用。说明Catalase可部分拮抗TGF-β1介导的肝纤维化血管生成的作用。