近红外探针及其内窥式近红外成像在Barrett's食管重度不典型增生诊断及治疗的基础和应用研究

High grade dysplasia (HGD) in Barrett's esophagus (BE) is considered to be a premalignant condition, as up to 59% of patients are associated with progression to esophageal adenocarcinoma (EAC) within 5 years. As the pre-cancerous lesions are usually promiscuously located, it is difficult for current biopsy methods to detect the HGD with high efficiency and accuracy, which leads to a high omission diagnose rate in routine clinical practice. The risk of EAC in certain patients, therefore, is underestimated. In order to increase the efficiency and accuracy of HGD detection and achieve the "Targeted biopsy" in BE patients, we construct two novel near infrared imaging（NIR） probes, WGA-ICG and SNFYMPL-ICG and evaluate their potential values in HGD diagnosis and treatment with the help of IRI endoscopy. This work will surely help to establish a new disease finding strategies and promote the endoscopic diagnose rate of HGD in BE. This work will have a great significance in reducing, even preventing the incidence of EAC in certain patients.

Barrett's食管伴重度不典型增生（HGD）是食管腺癌最重要的癌前病变，其5年恶性转化率高达59% 。然而，由于不典型增生通常呈不规则的散在分布，现有活检手段很难准确、有效地在病变部位取材，易造成不典型增生的漏诊，从而不能准确评估患者食管腺癌（EAC）发生风险。为更加准确、更加灵敏的在内镜下评估重度不典型增生，提高Barrett's食管伴不典型增生的检出率，本课题拟构建新型、高特异的BE伴重度不典型增生诊断探针近红外探针（NIR）WGA-ICG及SNFYMPL-ICG，结合近红外内镜技术在细胞、动物及临床离体标本等多方面探讨其在BE重度不典型增生诊断中的基础与临床应用价值，为建立近红外探针及近红外内窥技术诊疗消化系统疾病的新模式奠定理论和技术支持。课题的实施有助于推动内窥式分子影像学的发展和BE重度不典型增生诊断的相关研究，对于减少甚至预防食管腺癌的发生具有重要意义。

上消化道肿瘤的早期诊断对于上消化道早癌病人的早期治疗有着极其重要的意义。在上消化道肿瘤中，Barrett’s 食管伴重度不典型增生（HGD）和胃早腺癌是上消化道肿瘤的重要病变。然而，由于HGD和胃腺癌通常呈不规则的散在分布，现有白光内镜的检查方式很难准确、有效在病变部位取材，易造成早癌的漏诊，从而错误评估患者食管和胃腺癌发生风险。为提高上消化道早癌准确的诊断率，提高HGD和胃腺瘤的检出率，本课题拟构建新型的、高特异的针对HGD和早期胃腺癌诊断探针SNFYMP-CY5.5及SNFYMPL-FITC，结合近红外和共聚焦成像技术，在细胞，动物水平及临床离体标本等多方面探讨这些探针在上消化道早癌诊断中的基础与临床应用价值，在食管腺癌早期诊断方面，我们课题组已经成功合成特异性近红外探针cy5.5-snfymplgggsk，细胞层面方面，使用流式细胞术和在激光共聚焦显微镜下，发现cy5.5-snfymplgggsk与oe33结合最强。OE33裸鼠荷瘤模型发现，注射cy5.5-snfymplgggsk实验组荧光信号在各个采集时间点高于对照组，并且确定最佳的成像时间为6h。在24小时后裸鼠器官的ivis成像结果显示，实验组肿瘤，肝，肾的荧光信号较强。在胃癌早癌成像方面，合成了SNF*-FITC短肽荧光探针；荧光探针SNF*-FITC与胃癌细胞系具有较强结合能力，明显优于无关序列肽探针；荧光探针SNF*-FITC与胃癌组织具有较强结合能力，CLE观察可以区分离体胃癌组织和正常组织，并初步判断分化程度。48例本院胃癌手术病人切除组织冰冻切片进行荧光染色，胃癌组织中SNF*-FITC荧光染色阳性率为81.25 %，显著高于癌旁组织中SNF*-FITC荧光的染色阳性率27.08 %。本研究首次使用新型靶向肽SNFYMPL合成的近红外和共聚焦荧光探针用于食管和胃癌诊断的应用研究。为建立利用近红外探针及近红外内窥技术诊疗消化系统疾病的新模式提供了基础。本课题的实施有助于推动内窥式分子影像学的发展和BE 重度不典型增生诊断的相关研究，对于减少甚至预防食管腺癌和胃腺癌提供了良好基础。