氧化修饰对Neprilysin功能和调控的影响及药物靶点研究

β-淀粉样蛋白(Aβ)在脑内聚集并引起神经毒性是阿尔茨海默病（AD）的重要病理特征和关键环节，合成增多和分解减少是Aβ聚集的主要原因。占AD 90%以上的散发AD病人，Aβ降解酶减少起更为重要的作用，其中Neprilysin(NEP)结构或功能异常是Aβ降解减少的重要因素。研究表明NEP在AD脑中明显降低，并发生NEP的氧化修饰，提示NEP作为治疗靶点的研究对新一代抗AD药物的研发具有重要意义，但目前上述研究还很少，以Aβ降解酶为靶点的药物研究尚属空白。本课题拟采用AD转基因小鼠和HNE/Aβ损伤的细胞模型观察AD 不同阶段及HNE/Aβ处理后NEP表达的变化，细胞内分布和活性变化的规律；氧化修饰发生及其对NEP表达和分布的影响；应用LC-MS解析可能的氧化修饰位点，探讨NEP及其氧化修饰作为药物靶点进行药物设计和药物筛选的可行性，为建立药物筛选的方法和开发新一代药物提供理论和实验基础。

β-淀粉样蛋白(Aβ)在脑内聚集并引起神经毒性是阿尔茨海默病（AD）的重要病理特征和关键环节，合成增多和分解减少是Aβ聚集的主要原因。占AD 90%以上的散发AD病人，Aβ降解酶减少起更为重要的作用，其中Neprilysin(NEP)结构或功能异常是Aβ降解减少的重要因素。研究表明NEP在AD脑中明显降低，并发生NEP的氧化修饰，提示NEP作为治疗靶点的研究对新一代抗AD药物的研发具有重要意义，但目前上述研究还很少，以Aβ降解酶为靶点的药物研究尚属空白。本课题针对上述科学问题，采用AD转基因小鼠和HNE/Aβ损伤的细胞模型观察AD 不同阶段及HNE/Aβ处理后NEP表达的变化，细胞内分布和活性变化的规律，并与美国威斯康星大学医学院Dr.DENGSHUN WANG课题组合作，对不同发展阶段的AD病人脑组织中NEP水平，亚细胞定位及活性变化进行了研究，研究结果提示NEP蛋白水平在AD发病过程中的异常调节及亚细胞定位的异常对Aβ代谢网络的影响可能是老年斑形成的重要原因，并参与了AD发病过程；探讨了氧化修饰发生及其对NEP表达和分布的影响，应用LC-MS解析NEP-HNE修饰位点，为NEP及其氧化修饰作为药物靶点进行药物设计和药物筛选的可行性提供了理论基础。在本基金的资助下，进行了AD药物的筛选和部分机理研究。