重离子协同腺病毒载体靶向杀灭肿瘤细胞的机理研究

重离子是一种具有高传能线密度（LET）的电离辐射线，和传统的射线相比，具有更加高效的杀灭肿瘤细胞能力。经过改造的人类腺病毒目前已经在肿瘤临床基因治疗中应用，但单独使用其疗效仍然有限，与放、化疗等其它手段相结合可有效地提高对肿瘤的杀伤。在本研究中，我们通过构建辐射反应元件（Egr-1）调控的条件复制性腺病毒和复制缺陷型腺病毒，使其靶向性感染受辐照的肿瘤细胞。在此基础上，探讨不同能量、剂量和种类重离子对腺病毒诱导表达和协同杀灭肿瘤细胞的机理，为提高重离子肿瘤治疗的精确性、靶向性和治疗增益比提供重要的理论依据和实验数据。

本研究通过靶向基因治疗联合放疗进行肿瘤治疗。我们试图通过提高p53靶向溶瘤腺病毒的射线敏感性，同时联合放射治疗，达到提高抗瘤疗效。将一个放射敏感性启动子EGR-1连接TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)基因，插入p53靶向溶瘤腺病毒中，用EGR-1/TRAIL腺病毒联合放射治疗共同处理子宫颈癌细胞和荷瘤小鼠模型。体外实验表明，射线敏感溶瘤腺病毒联合低剂量放射治疗能够明显增加细胞死亡率和凋亡诱导率。动物实验表明该方法不仅可以抑制瘤体生长还能显著提高实验小鼠的生存期。说明，EGR-1/TRAIL溶瘤腺病毒对子宫颈癌能起到双重治疗效果，不仅能够提高射线治疗的效果，减少射线治疗副反应，而且保留了p53靶向溶瘤作用，为治疗子宫颈癌提供了一种新方法和新思路。.为了探讨以放射敏感性启动子 EGR-1 介导肿瘤治疗基因 TRAIL 腺病毒联合放射照射靶向性治疗肿瘤的可行性。体外实验中，以放射敏感性启动子 EGR-1介导TRAIL基因表达腺病毒及对照用腺病毒感染培养的肿瘤细胞株，并对腺病毒感染后的细胞予以一定放射剂量的放射照射。同时构建裸鼠葡萄膜黑色素瘤（UM）模型。证实放射照射可通过 EGR-1 启动子在时间和空间上调控 TRAIL 基因在肿瘤细胞株中的表达，并同时特异性增强了放射照射和 TRAIL 基因对UM的抗瘤效果。由此可得，放射调控基因治疗策略可用于治疗UM。.还进行了辐射诱导靶向基因治疗与α粒子联合抗肿瘤的旁效应的研究，证明了辐射诱导的靶向TRAIL基因治疗与辐射联合，可通过特异性增强对靶区周围肿瘤细胞的杀伤进一步提高放射治疗疗效。以及溶瘤腺病毒联合化疗药物治疗葡萄膜黑色素瘤的作用，联合治疗通过细胞周期阻滞对UM细胞具有协同杀伤效应，对正常细胞则没有叠加毒性。其它，还进行了siBCL-2联合化疗药物维生素K2抑制肝癌细胞生长的研究，Bcl2小干扰RNA联合H101溶瘤腺病毒治疗葡萄膜恶性黑色素瘤的研究，和靶向阻遏Notch1通路对葡萄膜恶性黑色素瘤的治疗效果等腺病毒杀伤肿瘤研究。.从事与本研究项目相关的毕业博士2名、硕士2名；还有在读博士生2名、硕士生3名。标注课题资助号的已经发表的论文10篇，其中SCI收录7篇总影响因子达到24.3分。