胶质瘤基因治疗特异性载体构建和治疗策略优化的研究

p53基因突变及p33ING1b入核障碍与胶质瘤发生密切相关，恶性胶质瘤细胞能高效激活PCNA启动子是构建特异性基因治疗载体的有利条件。本研究拟通过定点诱变制备表达产物能克服入核障碍的改造型p33ING1b编码cDNA；通过合理改造PCNA启动子制备转录效率高、转录起始位点稳定的增殖细胞特异性启动子PCNATAI；构建仅能在肿瘤细胞内、由PCNATAI特异性启动其下游插入基因（野生型p53和改造型p33ING1b的编码cDNA、MDM2 shRNA的编码基因）转录的真核表达载体及重组腺病毒；用它们介导上述外源基因在人恶性胶质瘤细胞系或其裸鼠皮下移植瘤内特异性表达；通过补充外源性抑癌蛋白及沉默内源性癌基因，实现针对p53功能网络不同环节的多基因联合治疗恶性胶质瘤的体内、外实验研究。最终目的是通过构建肿瘤细胞高度特异性表达载体和建立优化的治疗策略，以提高恶性胶质瘤基因治疗的安全性和治疗效果。