利用位点特异性重组酶构建用于基因治疗的基因载体

对人类疾病进行基因治疗和对动物进行遗传操作，都需要能将外源基因插入到染色体特定位点的工具。研究效率更高的, 具位点特异性的转基因载体, 一直是基因工程研究的重要方向之一。本项目拟利用噬菌体的位点特异性重组系统构建可用于基因治疗的载体。首先通过筛选获得噬菌体所编码的，能进行位点特异性重组的, 其整合作用不依赖噬菌体本身或其宿主所编码的辅助蛋白的重组酶。接着研究清楚重组酶在噬菌体上的和细菌染色体上的识别位点。然后利用PCR等手段在重组酶引入能提高其整合效率和识别人类染色体"pseudo attB"位点的突变，并在此基础上构建可用于人类和其它哺乳动物细胞的基因载体。.本项目的最终目的是建立一个具有我国自主知识产权的，能够将外源基因位点特异性整合到染色体上的基因载体和相关的完整试验方案，提供给医学界用于基因治疗。新的重组酶和其识别位点还可用来构建新的快速克隆和表达质粒体系。