基于方剂配伍和药物体内相互作用理论的芪芎有效部位配伍抗脑缺血性损伤机制研究

Astragalus and ligusticum wallichii （Qixiong）has been the core compatibility of Chinese medicine prescriptions and preparation of supplementing qi and activating blood, which has exact curative effect on cardiovascular disease such as cerebral infarction. The in-depth mechanism research of compatibility of Qixiong is needed..Content: Take Qixiong compatibility for demonstration, combined the Qixiong main active material area (saponins, alkaloids, phenols, volatile oil etc.) with orthogonal method，based on the theory of compatibility of TCM "monarch，minister，adjuvant and dispatcher"etc.and drug interactions. Making the brain ischemia reperfusion model, using microdialysis sampling from the dual channels of blood and brain, focused on dynamic observation of the Qixiong compatibility pharmacological effect (Neural function, GSH-Px，ATP，NO，cerebral blood flow etc.); Using HPLC and LC/MS determinate index compositions，which is synchronous with pharmacodynamic.Simultaneously observe index compositions' absorption characteristics in Caco-2 cell model.Constructing the PK-PD model with multidimensional comprehensive simplified method, linear or nonlinear equation etc., to analyse drug interactions of multiple components, main and auxiliary, the optimum compatibility etc., and to discuss mechanism effect of the optimum Qixiong compatibility against cerebral ischemia reperfusion injury ( Bcl-2，VEGF，NMDAR etc.)..Significance: Analysis compatibility principle and mechanism of anti cerebral ischemic injury, find the best compatibility prescription，guide the clinical treatment，provide a new method for the compatibility of Traditional Chinese Medicine.

黄芪与川芎（芪芎）已是"益气活血"中医方剂、制剂的核心配伍，对脑梗死等心脑血管病具确切疗效，但对以芪芎为核心配伍机制尚需深入研究。.内容：遵循中医 "君臣佐使"等配伍、药物相互作用理论，以芪芎配伍为示范，正交法组合芪芎主要活性物质部位（皂苷、生物碱、酚类、挥发油等）。制作MCAO脑缺血模型，采用血脑双通道微透析技术取样，重点动态观察芪芎各配伍药理效应（神经功能、GSH-Px、ATP、NO、脑血流等）；HPLC、LC/MS等测定与药效学同步的芪芎代表成分动态变化。观测芪芎的Caco-2细胞吸收特征。采用多维综合简化、线性或非线性方程等，构建PK/PD模型等，分析芪芎多成分相互作用与配伍原理等。探讨芪芎最佳配伍抗脑缺血性损伤（Bcl-2、VEGF、NMDAR等）的作用机制。.意义：分析芪芎配伍原理及抗脑缺血损伤机制，寻找最佳配伍组方，指导临床合理用药，为中药配伍研究提供新方法。

黄芪与川芎（芪芎）是“益气活血”中医方剂、制剂的核心配伍，本项目遵循中医“君臣佐使”等配伍、药物相互作用理论，以芪芎配伍为示范，制作MCAO脑缺血等模型，动态观察芪芎各配伍药理效应；测定与药效学同步的芪芎代表成分动态变化，观测芪芎的Caco-2细胞吸收特征，并采用线性或非线性方程等，构建PK/PD模型等，探讨芪芎最佳配伍抗脑缺血性损伤的作用机制，分析芪芎多成分相互作用与配伍原理等。现已按研究计划，经三年研究完成了研究任务，取得了较好成果。.主要内容和重要成果：高效液相色谱法、紫外分光光度法等，结合正交、大孔树脂等分离纯化提取黄芪、川芎中有效部位及成分如皂苷（黄芪甲苷等）、多糖、生物碱（如川芎嗪等），并组合成用量配比不同的组方；采用大鼠大脑中动脉局灶性栓塞（MCAO）、脑内皮细胞缺血缺氧损伤模型，通过检测脑梗死体积，脑含水量、脑指数，缺血侧脑组织SOD活力、MDA含量，Bcl-2和Bax蛋白表达，以及尼氏小体数等指标，结果表明黄芪、川芎有效成分不同配伍脑缺血再灌注损伤动物或缺血缺氧细胞损伤均具有较好的保护作用；采用Caco-2细胞模型，研究芪芎不同配伍在人体小肠吸收过程中的吸收特性、转运机制和配伍原理；采用HPLC等测定脑缺血动物血、脑微透析样品中黄芪甲苷、川芎嗪、阿魏酸等成分不同时间点的浓度，开展药动学（PK）研究，分析主要有效成分的体内过程；选用与脑缺血性损伤密切相关的药效指标，如SOD、MDA、LDH、脑内氨基酸、细胞凋亡率、IL-1β、Caspase-3基因表达等，同步开展药效学（PD）研究；对药效、药动数据数学处理，构建药动学与药效学联合模型（PK-PD模型），阐述芪芎配伍多成分在体内的浓度变化特征及相互作用，探讨芪芎配伍产生综合效应的原理。.本项目开展了芪芎配伍的药动学、药效学，同时建立芪芎配伍药动学（PK）与药效学（PD）联动数学模型，分析芪芎配伍原理及抗脑缺血损伤机制，探讨方剂（中医配伍）发挥整体、综合效应的作用原理，指导临床合理用药，为中药配伍研究提供新方法。.现已将相关研究成果整理撰写发表相关科研论文，正式发表21篇，其中SCI收录3篇，会议论文1篇（均带标注）；出版著作2部；浙江省科学技术奖二等奖1项，浙江省中医药科学技术奖二等奖1项；获国家发明专利授权1项；项目负责人入选为浙江省“新世纪151人才工程”第二层次培养人员；培养研究生2名。