I型干扰素在TGEV与树突状细胞相互作用中的免疫功能及调控机制研究

猪传染性胃肠炎（TGE）是猪的一种急性高度接触性肠道传染病，给养猪业造成了极大的危害，目前关于TGE的免疫致病机制尚不清楚。课题组前期研究结果表明TGEV体外可感染猪浆细胞样树突状细胞（pDC），且能诱导pDC分泌大量I型干扰素（IFN）。但I型IFN是如何发挥抗病毒作用，TGEV对pDC介导的I型IFN信号通路的影响及其机制，尚不明确。据此，本项目拟应用荧光蛋白标记亚细胞定位技术、荧光素酶报告基因检测技术和免疫共沉淀技术等研究TGEV感染对pDC介导的I型IFN信号通路的影响，分析I型IFN诱导抗病毒蛋白的表达情况，明确I型IFN在TGEV与pDC相互作用中的免疫功能及调控机制，揭示TGEV免疫逃逸机制，为TGE的防控提供理论指导，同时也为研究其它冠状病毒的免疫致病机制提供新的思路。

树突状细胞（DC)是专职的内源性I型IFN产生细胞，其介导的I型IFN信号通路在机体的抗病毒免疫中起着核心作用，与病毒感染诱导的先天性免疫应答反应和病毒的免疫逃逸有着紧密的联系。本研究以猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）体外感染DC为研究对象，研究了I型IFN(IFN-a)是如何发挥其抗病毒作用的，以及TGEV感染对DC介导的I型IFN信号通路的影响。项目主要从以下几方面开展研究并且得出以下结果：首先，建立并优化了体外分离猪外周血DC的方法，通过诱导获得了未成熟和成熟的DC，为研究DC在TGEV感染中的免疫功能奠定了基础；其次，研究了TGEV对DC的感染性，比较分析了TGEV在DC和ST细胞中的生长动力学差异；进而研究了TGEV感染不同宿主细胞（ST细胞和DC）产生细胞因子的动态差异，系统研究了TGEV与IFN-a的相互作用关系；最后，研究了TGEV感染激活I型IFN通路的过程，以及其诱导IFN相关抗病毒蛋白的表达情况，证实了TGEV感染激活了IFN-a信号通路，其产生的IFN-a发挥了抗病毒作用。本研究为研究TGEV的先天免疫应答反应奠定了基础，同时也为研究其它冠状病毒的免疫致病机制提供新的思路。