新型催眠活性物质粉防己碱及其结构优化衍生物的作用机理研究

已上市催眠药，多作用于GABAA受体，会产生耐受、依赖和成瘾等问题。探寻作用于非GABAA受体通路的催眠药，就成为了克服不良反应的研发新策略。前期，我们发现粉防己碱(TET)与戊巴比妥钠具有协同催眠作用，其机制与5-HT1A及5-HT2A/2C受体相关，而与GABAA受体通路无关。通过结构优化，选出了活性更强的YH201和YH202，并发现TET、YH201和YH202均可显著延长正常小鼠的总睡眠时间、非快动眼睡眠和快动眼睡眠时间，而对睡眠时相的影响与其它催眠药有明显的区别。推测其作用机制有别于其它催眠药。而作用机制不同，有可能克服上述不良反应，同时也可能找到新的与睡眠障碍相关的适应症。本课题拟采用睡眠脑电定量分析、免疫组化、HPLC、放射自显影及蛋白组学等方法，进一步研究TET及其活性优化结构的作用机制，探索新的催眠作用靶点和调控网络，为发现新型催眠药物提供新的实验及理论依据。

粉防己碱（TET）是从中药Stephania tetrandrae S Moore中分离提取的一种双苄基异喹啉类生物碱。本实验室以往的研究表明，TET能够增强戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠，并且TET增强戊巴比妥钠诱导的睡眠作用与5-HT1A和5-HT2A/2C受体有关。.为了开发催眠效果更强、安全性更好的双苄基异喹啉生物碱类催眠药，我们对TET进行结构改造，并针对第1系列的YH-101、YH-102；第2系列的YH-200、YH-201和YH-202衍生物对正常小鼠的催眠药效学、作用机制进行了研究。另外还研究了TET对自发性高血压大鼠（SHR）的降压和催眠作用，并对这两种作用之间的可能相互关系进行了探讨。.研究结果发现：.1. TET及其5种衍生物对正常小鼠都有催眠作用，排序为：YH-201＞YH-202＞YH-200≈YH-101＞YH-102＞TET。综合考虑药物的有效性、安全性及生产成本，选YH-200为最优化结构；.2. YH-200可明显增加大鼠和小鼠的总睡眠时间，其中对NREM睡眠中的浅睡眠影响显著，对深睡眠时间和快眼动睡眠时间影响不大；.3. DRN背侧部 (DRND)、DRN腹侧部 (DRNV)和DRN腹外侧部 (DRNVL)可能与TET及其优化结构衍生物YH-200的催眠作用相关，而与GABA能神经(VLPO)、组胺能神经(TMN)、去甲肾上腺素能神经系统(LC)无明显相关性；.4. TET及YH-200对下丘脑、海马、中缝背核及腹外侧视前核（VLPO）中的γ-氨基丁酸、组胺、乙酰胆碱的水平未产生明显影响。其作用机制可能是通过促进DRN中5-HT和DA的代谢，以及下丘脑中5-HT的代谢，并抑制下丘脑、海马中缝背核及腹外侧视前核（VLPO）去甲肾上腺素水平，以及抑制中缝背核中的多巴（DOPA）的水平等相关；粉防己碱和YH-200还增加了细胞内氯离子浓度；.5. TET能够降低SHR大鼠的血压并促进其睡眠，其作用可能是通过调节SHR大鼠DRN和VTA中的5-HT系统起作用。TET对WKY大鼠的促睡眠作用可能是通过调节DRN中5-HT的系统产生的；.本课题取得了具有国际先进水平的研究成果，对睡眠调控网络机制的研究具有重要意义。