姜黄素类似物A13分离GVHD和GVL的作用与机理研究

同种异基因造血干细胞移植是恶性血液疾病的首选治疗方法，但其并发症移植物抗宿主病（GVHD）的高发生限制了它在临床上的应用。移植物去除T细胞有效地预防了GVHD，但是也失去了它的对抗白血病（GVL）效应，使得肿瘤复发率增加。因此，开发选择性抑制同种异基因T细胞GVHD效应的药物将具有极大的临床价值。最新的研究显示，白介素-6（IL-6）是导致GVHD发生的主要因素之一。在早期的研究中，我们发现具有自主知识产权的姜黄素类似物A13能够通过转录后抑制，在体内外模型中降低LPS所诱导产生的IL-6；而且体外抗肿瘤实验也显示，A13对小鼠B淋巴瘤细胞具有促凋亡作用。本课题中，我们将以急性GVHD白血病小鼠为模型，验证化合物A13能够通过减少IL-6的表达抑制GVHD，同时协同供者T细胞杀伤肿瘤的假设，并初步探讨其分离GVHD和GVL的作用机理，为将来开发抗白血病新药打下基础。

同种异基因造血干细胞移植是恶性血液疾病的首选治疗方法，但其并发症-移植物抗宿主病（GVHD）的高发生限制了它在临床上的应用。移植物去除T细胞有效降低了GVHD的发生，但是也使它失去了移植物抗白血病（GVL）的效应，使得肿瘤复发率增加。在早期的研究中，我们发现具有自主知识产权的姜黄素类似物A13在体外能够在小鼠巨噬细胞中抑制LPS诱导产生白介素6（IL-6），而IL-6是导致GVHD发生的主要因素之一。同时，化合物A13在体外能抑制小鼠网状细胞肉瘤细胞（A20细胞）的增殖。因此在本课题中，我们以急性GVHD白血病小鼠为模型，验证化合物A13能够通过减少IL-6的表达抑制GVHD，同时协同供者T细胞杀伤肿瘤的假设。我们的研究结果显示，化合物A13在非TBI急性GVHD小鼠模型中没有显著治疗作用。针对此结果，我们通过抗炎、抗肿瘤、毒性检测和混合淋巴细胞反应四种药物筛选方法，重新筛选获得新的候选化合物X22。化合物X22能在体外拮抗LPS诱导的炎症反应、抑制A20细胞增殖、对非肿瘤细胞低毒，并具有免疫调节活性，因此在后续的实验中，我们采用X22取代A13进行实验。随后，我们证实了X22能剂量依赖性地提高GVHD患鼠的生存率，改善受鼠GVHD症状，降低GVHD受体靶器官的损伤。其作用机理可能是通过降低移植受鼠体内GVHD靶器官中TNF-a的表达，同时增加具有保护作用的IFN-y。体内抗肿瘤实验也显示，X22能剂量依赖性地提高A20肿瘤小鼠的生存率，其抗肿瘤作用是通过抑制Bcl-2、COX-2，同时上调Bax在肿瘤中的表达，从而导致Caspase-3蛋白活化，最终抑制炎症，有效诱导A20细胞发生凋亡。最后，我们考察了X22在移植受鼠体内分离GVHD及GVL的药效，X22有效抑制GVHD，但不影响移植T细胞对肿瘤的杀伤作用。我们的研究结果初步验证了X22分离GVHD和GVL的药效及作用机理，为将来开发抗白血病新药打下基础。