人参拮抗蟾酥心脏毒性的作用机制

药性与毒性并存，既有毒又有效是其生存基础。如何发挥有毒中药的疗效，减少毒副作用，安全、有效、合理地运用是关系到国民健康的大事。蟾酥具有类洋地黄作用，蟾酥引起的心脏毒性与心肌细胞内钙超载密切相关，人参具有钙拮抗样作用，具有抗心律失常、保护心肌、抗心力衰竭的作用。故二者配伍应用能够减轻蟾酥的心脏毒性，达到"减毒"的目的。本项目以蟾酥和人参提取物配伍为研究药物，以减毒为目标，通过对心脏毒性的早期心肌反应和迟发反应的观察，以心肌钙超载后导致的一系列生理生化反应为主线，围绕钙超载导致的心肌肥厚基因上调、代偿机制的激活、细胞因子的释放和最终导致的细胞凋亡和坏死等多指标多效应进行综合信息分析，进一步探讨蟾酥的心脏毒性及其毒性机制，以及人参配伍减毒作用的途径和靶点，诠释蟾酥和人参配伍减毒的科学内涵，为蟾酥安全、有效地应用于临床提供支撑和科学依据。

蟾酥具有强心、抗肿瘤等药理作用，但不当使用则会产生心脏毒性，人参具有保护心肌等作用。本项目以减毒为目标，以蟾酥和人参提取物配伍为研究药物，通过对心脏毒性的早期心肌反应和迟发反应的观察，诠释蟾酥和人参配伍减毒的科学内涵，为蟾酥安全、有效地应用于临床提供支撑和科学依据。.本项目首先采用BiOPAC生理记录系统记录正常豚鼠给蟾酥前后Ⅱ导联心电图的变化，观察蟾酥引起心律失常及死亡率以及配伍人参对上述指标的改善情况。进行蟾酥提取物对小鼠、大鼠急性毒性和蓄积毒性试验研究。在此基础上体外培养正常大鼠乳鼠原代心肌细胞，观察蟾酥、人参以及二者配伍对细胞活力、细胞上清中LDH以及线粒体膜电位的影响、荧光法观察药物对[Ca2+]i荧光强度的影响、流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果表明，（1）蟾酥单用随着剂量增大可产生明显的心电图异常，15.0 mg/kg、60.0 mg/kg使正常清醒豚鼠心电图发生变化，主要表现为QRS波脱落，P-R间期延长、T波倒置等，且随着蟾酥剂量的增加，心电图异常变化程度增加。甚至导致死亡。以蟾酥60.0mg/kg配伍人参（配伍比例1:2、1:3、1:4）上述心电图异常随着人参剂量增大心电图改善明显。蟾酥未死亡豚鼠给药24h后，心电图恢复到正常水平。（2）蟾酥分别给小鼠一次灌胃用Bliss法测定LD50值为33.8233（31.5009-36.3169）mg/kg，相当于药典推荐剂量15-30mg生药/人的135.29-67.65倍。 分别给大鼠一次灌胃给药用Bliss法测定LD50值为571.5576（511.6638-638.4628）mg /kg，相当于药典推荐剂量15-30mg生药/人的2286.23-1143.12倍。（3）蟾酥则促进细胞外钙内流和细胞内结合钙释放，使细胞[Ca2+]i浓度增加，线粒体膜电位下降，增加心肌细胞凋亡和LDH释放，导致细胞活力下降。蟾酥配伍人参后，可以增加细胞活力，减少线粒体膜电位损伤，抑制心肌凋亡，能一定程度的降低蟾酥所导致的[Ca2+]i浓度增加，使其低于蟾酥组但高于空白组。从而起到了拮抗蟾酥心脏毒性的作用。培养硕士研究生1名；发表标注中文文章1篇，正在审稿SCI文章1篇。