MicroRNA-155在腹主动脉瘤发生发展中的作用及其机制研究

At present, the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm (AAA) is not clear with no non-operation-therapy. Published literature and our previous research found: ①miR--155 in AAA body biopsies and serum was increased, ②NF-κB and TGF-β pathway participate in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm, ③miR-155 can regulate NF-κB and TGF-β pathway through its target genes, ④Drugs can inhibit the development of AAA through the inhibition of NF-κB or the activation of TGF-β pathway. Therefore, we hypothesize that miR-155 can activate NF-κB and inhibit TGF-β pathway through its target genes, which participate in the the pathogenesis, development and rupture of AAA. To test the hypothesis, we will establish the mouse AAA models, construct lentiviral vector to induce the overexpression of miR-155, use the LNA-anti-miR-155 to inhibit the expression of miR-155. The aim is to uncover the role of miR-155 played in the pathogenesis and development of AAA and to evaluate the possibility of using miR-155 as a risk marker and non-operation-therapeutic target of AAA.

腹主动脉瘤（AAA）发病机制至今仍不清楚，目前也缺乏有效的非手术治疗手段。现有文献报道及我们前期的研究发现：①AAA组织中及患者血浆中miR-155表达水平增高；②NF-κB及TGF-β信号传导通路在AAA形成和发展过程中均有重要作用；③miR-155可通过靶基因调控NF-κB及TGF-β信号传导通路；④通过药物抑制NF-κB或激活TGF-β信号传导通路可抑制AAA生长。因此，我们假设：miR-155可能通过靶基因激活NF-κB信号传导通路并抑制TGF-β信号传导通路，参与了AAA的发生发展及破裂。为了验证假设，本研究拟建立小鼠腹主动脉瘤模型，通过构建慢病毒包装载体诱导miR-155过度表达，以及应用LNA-anti-miR-155抑制miR-155表达，旨在进一步认识腹主动脉瘤形成及发展过程，分析miR-155用于评估腹主动脉瘤扩张、破裂风险并作为腹主动脉瘤非手术治疗靶点的可行性。

背景：腹主动脉瘤（AAA）是一种潜在致命性疾病，然而目前，这种严重危害人类健康疾病的唯一有效治疗方法只有手术治疗，若能找到抑制腹主动脉瘤扩张的非手术方法，或在其破裂前进行手术，从而预防腹主动脉破裂，将为患者带来极大的益处。现有研究显示只有 miR-155同时在瘤体组织中及腹主动脉瘤患者血浆中表达显著上调，提示miR-155可能参与了腹主动脉瘤的发病过程。.主要研究内容：.miR-155在腹主动脉瘤大鼠模型中的表达变化及作用机制，以及miR-155过度表达及抑制表达对大鼠腹主动脉瘤发生发展的变化及作用机制.重要结果及数据：.miR-155 上调组， 下调组，对照组给药后7天腹主动脉瘤平均直径分别为3.42±0.34，3.26±0.35，3.31±0.35（P＜0.01）。进一步行组内分析发现，上调组大鼠腹主动脉瘤直径呈渐进性增大，注射后7天，14天，21天，28天直径分别为：3.19±0.34，3.42±0.34，3.53±0.35，3.62±0.32，3.72±0.29（P＜0.01）。下调组大鼠腹主动脉瘤直径给药后7天，14天，21天，28天直径：3.21±0.36，3.26±0.35，3.27±0.33，3.29±0.31，3.30±0.35（P = 0.37）。Real-time PCR结果显示：miR-155上调组腹主动脉瘤组织中miR-155 相对表达量为2.26±0.51，下调组为 0.50±0.13，对照组为 1.13±0.20（p = 0.02）。以对照组各检测蛋白 mRNA 表达量做参照，SOCS-1在上调组的相对表达量为 0.72±0.51，下调组为 8.26±0.34（p＜0.01）；上调组NF-κB3 相对表达量为12.47±1.32，下调组为 0.34±0.53（p＜0.01）；上调组TGF-β1 相对表达量为 1.62±0.43，下调组为1.77±0.52（p=0.91）；上调组SMAD2 相对表达量为 1.33±0.41，下调组为1.41±0.76（p=0.07）。.Western Blot检测结果显示：上调组，对照组，下调组腹主动脉瘤组织中SOCS-1 蛋白相对表达量为：0.48±0.27，0.81±0.21，0.79±0.30（p=0.02）；NF-κB3 蛋白相对表达量分别为：0.61±0.19，0.32±0.11，0.59±0.