狂犬病毒在动物体内的移行规律

狂犬病毒的致病机理和在动物中的移行规律仍有许多盲点。本项目将充分运用病毒学、分子生物学、影像学的原理和方法探索狂犬病毒在小鼠体内的移行。为了获得便观察的示踪病毒，我们将首先运用已建立的狂犬病毒反向遗传操作平台，构建携带绿色荧光蛋白基因的全基因cDNA感染质粒，再在BHK-21细胞中拯救表达绿色荧光蛋白的嵌合病毒。通过改变培养条件，在BHK-21细胞中筛选稳定繁殖、高效表达的嵌合病毒克隆株。将该病毒株接种细胞、小鼠和乳鼠，研究该毒株的生物学特性，建立病毒感染的动物模型。以荧光标记狂犬病毒在神经形态学和生理学研究取得的突破为借鉴，借助先进的活体动物体内成像系统简便、实时、定量等优势，以显微解剖学、超薄冷冻切片和透射电镜、激光共聚焦扫描电镜等技术为辅助手段，研究狂犬病毒体内侵染、复制及时空移行和动态分布规律，将给狂犬病毒致病机制研究带来新的希望。