BRD7基因剔除小鼠模型的构建及其抑瘤功能研究

BRD7是我室自主克隆的全长新基因，10余年来的工作基础证实BRD7是一个核转录调节因子，通过对多信号通路的调节而参与细胞内重要生物学功能，是一个重要的候选抑瘤基因。尽管，BRD7基因抑瘤功能和作用机制研究已经取得了突破性的进展，但仍然缺乏强有力的体内实验依据。为此，本项目通过构建BRD7条件性基因剔除小鼠模型，全面考察BRD7剔除后小鼠大体表型的改变，确定与BRD7抑瘤功能相关的外在表型或其它新的表型；综合比较BRD7剔除对小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）增殖、细胞周期、凋亡、细胞运动、迁移以及突变型K-ras细胞转化能力等的影响，对小鼠自发性和诱发性肿瘤或与c-Myc杂交后子代鼠自发性肿瘤形成的时间、大小和生存率的影响，从而阐明BRD7在小鼠中的抑瘤功能；进一步通过基因芯片杂交和生物信息学分析，比较BRD7剔除后信号转导通路的异常改变，从而揭示BRD7在小鼠中抑瘤的分子生物学机制。

BRD7是我室自主克隆的抑瘤基因及潜在核转录因子，通过对多信号通路的调节参与鼻咽癌等恶性肿瘤的发生发展。通过本课题的研究，构建了特异性针对小鼠BRD7的多克隆抗体，系统研究了BRD7在成年小鼠全身各个组织中的表达规律；成功构建了BRD7基因条件剔除小鼠模型；完成了BRD7剔除后小鼠外在表型的全面观察，发现BRD7剔除导致小鼠生殖、发育和免疫等一系列重要生理功能的异常或缺陷，并进行了深入的功能和机制研究：发现BRD7通过抑制DNA损伤修复、诱导精子细胞凋亡，从而使精子细胞发育障碍而导致小鼠雄性不育；通过影响Cyclin D1的表达和P53蛋白的稳定性抑制MEF细胞生长及小鼠胚胎发育；通过影响MAPK及Cytokine-Cytokine受体交互作用通路参与小鼠免疫抑制及对炎症的易感性。由于在本课题的实施过程中，没有出现预期的BRD7抑瘤表型，但系统研究了BRD7参与小鼠雄性不育、胚胎发育及炎症发生等的功能和机制，对于全面阐述BRD7的功能和分子机制具有非常重要的意义。