hsa-miR-141在鼻咽癌中的功能和分子网络机制研究

miRNA是一类小分子非编码RNA，以"癌基因或抑癌基因"角色参与肿瘤发生发展。has-miR-141是鼻咽癌中受"c-Myc/BRD7"轴正性调节的miRNA，在鼻咽癌中表达上调，具有促进鼻咽癌细胞恶性增殖的生物学功能。本项目拟构建miR-141稳定表达或沉默的鼻咽癌细胞系，探讨miR-141对细胞增殖、周期、凋亡、侵袭和转移等细胞生物学功能的影响，为其在鼻咽癌中 "癌基因"角色定位奠定基础；通过基因芯片杂交和蛋白质组学技术，确定miR-141调控的靶基因及参与的信号通路；确定恢复miR-141靶基因表达及信号通路活化对miR-141介导的细胞生物学功能的影响；探讨c-Myc、BRD7转录调控miR-141表达的模式；构建 "c-Myc/BRD7/miR-141/靶基因/信号通路/表型"交互作用的分子网络；确定其在鼻咽癌中表达之间的相关性及临床意义，为鼻咽癌发生发展的分子机制奠定基础。

Has-miR-141 在多种肿瘤中发挥重要生物学功能，本研究拟进一步探讨miR-141在鼻咽中的生物学功能、调控机制及参与的信号通路网络。通过该项目的研究，我们利用c-Myc稳定沉默的鼻咽癌细胞模型，系统研究了c-Myc对于鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响，发现并证实c-Myc通过影响Cdk/Rb/E2F信号通路参与鼻咽癌的发生发展；证实BRD7在转录水平受到c-Myc转录因子的负性调控，并在c-Myc稳定沉默的鼻咽癌细胞中恢复BRD7的表达能明显逆转c-Myc介导的恶性细胞生物学表型的发生；确定miR-141通过非直接方式在转录水平受到BRD7的负性调控，并在BRD7稳定表达的鼻咽癌细胞系中，恢复 miR-141的表达能明显逆转BRD7的抑瘤表型及参与的PTEN/AKT信号通路；从而构建了 "c-Myc/BRD7/miR-141/PTEN/AKT信号通路/表型"交互作用的分子网络；进一步在大样本鼻咽癌活检组织或外周血中，发现BRD7与鼻咽癌的发生发展、预后及miR-141的表达呈负相关，筛选到了一批鼻咽癌早期诊断的蛋白质、miRNA分子标志物或靶标系统，为鼻咽癌发病的分子机制和临床诊疗提供了重要的理论依据。