原癌基因SPHK1诱导胃癌早期转移的分子机制

我们前期研究证明原癌基因SPHK1蛋白表达水平与临床胃癌的浸润及转移成正相关(已发表）。我们进一步发现高表达SPHK1能诱发肿瘤转移的早期关键事件-上皮细胞间质化(EMT)，如胃癌上皮细胞向间质化细胞转变，间质化标志蛋白表达改变（E-cadherin等下调，Vimentin等上调）,胃癌细胞浸润能力增强，以及EMT相关转录调控因子Snail表达水平显著升高， 但分子机制仍待阐明。本项目将以稳定表达SPHK1及其RNAi细胞为模型，通过染色体免疫共沉淀、蛋白免疫共沉淀及荧光素酶报告基因分析等方法,研究SPHK1诱导EMT的分子机制,探讨SPHK1上调Snail及下调E-Cadherin的信号通路，并在体内体外检测SPHK1对细胞浸润迁移能力的影响及分析SPHK1与临床肿瘤转移相关性,为过表达SPHK1上调Snail,进而诱导EMT的假设提供证据,并为治疗恶性肿瘤提供新的分子靶点。

我们前期研究证明原癌基因SPHK1蛋白表达水平与临床胃癌病理分级分期密切相关，但其与胃癌的发生发展及其生物学功能尚不明确。为了进一步阐明SPHK1 蛋白在肿瘤发生发展中的生物学功能，本课题从二个方面进行了探讨。(1)本课题研究中我们发现miR-124可通过与SPHK1-3`UTR相结合而抑制SPHK1的表达，而在胃癌中miR-124表达与SPHK1水平附相关。与下调SPHK1相一致，高表达miR-124显著抑制胃癌细胞体内体外的恶性程度。进一步，我们证明下调SPHK1可通过降低Akt活性，诱导FOXO1的转录活性而导致胃癌细胞中p21与p27的转录升高，从而抑制胃癌细胞的增值与转移。而高表达miR-124可下调SPHK1并抑制胃癌细胞的恶性程度。(发表文章1 篇)。(2)为证明SPHK1可做为肿瘤治疗靶位点， 我们统计分析发现SPHK1高表达的涎腺癌患者生存时间明显低于SPHK1低表达的涎腺癌患者生存时间，但如果对SPHK1高表达的涎腺癌患者进行新辅助治疗，这些患者的生存时间则明显延长；然而新辅助治疗对SPHK1低表达的涎腺癌患者的生存时间并未有太大意义。(发表文章1 篇)。