MiR-124a调控SPHK1及NFκB抑制胃癌转移的分子机制

我们前期研究发现miR-124a在胃癌组织中表达下降，与胃癌分期负相关。过表达癌基因鞘胺醇激酶1(SPHK1)促进胃癌细胞侵袭和转移，而过表达miR-124a可下调SPHK1表达，肿瘤细胞侵袭能力也下降；进一步研究发现过表达miR-124a还下调Snail表达，抑制NFκB转录活性及上皮细胞间质转化(EMT),但机制尚待阐明。本项目将以高表达或沉默miR-124a的细胞为模型，通过microRNA芯片、定量RT-PCR、原位杂交及荧光素酶报告基因分析等方法,探讨miR-124a下调SPHK1，降低NFκB转录活性及下调Snail的信号通路，并通过体外三维细胞培养、定量活细胞迁移及在体胃癌动物模型确定miR-124a阻断EMT、抑制肿瘤细胞转移和浸润的功能，为探讨miR-124a调节SPHK1表达的分子机理以及通过NFκB信号通路抑制EMT的假设提供证据,并为胃癌治疗提供新的途径。

microRNAs具有转录后调控基因表达的功能，某些microRNAs可作为癌基因或抑癌基因，可作为肿瘤预后和诊断分子标记物，近年来成为肿瘤研究领域的热点。.鞘胺醇激酶 1(SPHK1)参与多种人类肿瘤的发生和进展，其作用的分子机制尚待阐明。我们先前的研究发现，SPHK1上调与miR-124表达呈负相关。本项研究证明了SPHK1是miR-124的靶基因,miR-124直接与SPHK1的3’-UTR结合下调其表达。体内外实验证明，与RNA干扰敲除SPHK1基因结果相似, 上调miR-124抑制胃癌细胞增殖和裸鼠皮下肿瘤形成。进一步机制探讨表明，miR-124激活FOXO1转录因子,抑制AKT信号通路,上调细胞周期蛋白抑制分子P21、P27。研究结果为揭示SPHK1 的生物学功能及其在胃癌发生发展中的作用机制提供了科学依据，为胃癌治疗提供新的分子靶点。miR-124 抑制SPHK1参与胃癌的发生和进展的研究已经发表在2012年JP。.我们根据肿瘤相关microRNA 表达芯片公共数据库，发现胃癌患者肿瘤组织中miR-362表达上调。在本项目的资助下，我们发现 miR-362过表达激活炎症相关的NF-κB 通路，促进细胞增殖和化疗药物抵抗，进一步研究发现MiR-362 是通过与3‘-UTR结合的转录后调控机制下调抑癌基因CYLD 的表达从而使NF-κB通路活化。这部分研究内容已经发表在JTM(2013)。.miR-139可能作为抑癌基因在多种肿瘤中下调，我们发现磷酸二脂酶家族成员PDE4D是miR-139新的靶基因。文献报道PDE4D可作为癌基因。本项目的部分资助下，研究初步研究发现胃癌组织中MiR-139与癌基因PDE4D表达负相关，进一步的机制研究实验在进行中。.在本项目的资助下，我们关于MIF和CyclinD1的关系及在HCC发生发展中的重要作用的研究进一步研究，论文发表在Oncotarget（2014）。关于EGFR表达和肿瘤干细胞标志分子CD44/CD24 与乳腺浸润性导管癌预后的关系研究发表于Med Oncol.( 2015).