CD5+调节性B淋巴细胞在间充质干细胞治疗多发性硬化疾病中的作用机制

Multiple sclerosis is a central nervous system autoimmune demyelinating disease. It has been demonstrated that mesenchymal stem cells (MSCs) for multiple sclerosis have a significant therapeutic effect, however, the exact mechanism remain unclear. Previously, we have shown that mesenchymal stem cells can effectively promote the experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE), one of the classic animal model of multiple sclerosis in mice, recovery of the neurological function and significantly increase the IL 10-CD5+B regulate lymphocytes, but the mechanisms involved in the effects need to further study. Therefore, the current project utilized in vivo and in vitro to investigate the biological role the MSCs on CD5+B regulate lymphocytes, including apoptosis, proliferation, differentiation, and cytokine secretion. Furthermore, by using the adoptive therapy experiments and CD19-/- knockout mice to prove the function of the CD5+B regulate lymphocytes on the experimental autoimmune encephalomyelitis, and explain clearly the mechanism of MSCs immunomodulatory therapy for multiple sclerosis.

多发性硬化是中枢神经系统常见的自身免疫性脱髓鞘疾病。已有研究显示间充质干细胞（MSCs）对多发性硬化具有显著的治疗效果，但具体机制尚不清楚。我们已在前期的研究中发现间充质干细胞能有效地促进实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠临床病情的缓解，并伴随着CD5+ 调节性B淋巴细胞及其分泌的IL-10水平显著增加，但哪些机制参与了MSCs对CD5+调节性B淋巴细胞的影响仍不清楚。本研究拟通过构建体内、体外实验模型研究观察MSCs对CD5+调节性B淋巴细胞凋亡、增殖、分化以及细胞因子分泌水平的影响，明确MSCs影响CD5+调节性B淋巴细胞的数量和功能的分子机制，并通过采用过继治疗实验和CD19-/-基因敲除小鼠验证MSCs主要是通过CD5+调节性B淋巴细胞为靶细胞发挥治疗作用，进而阐明其在MSCs治疗多发性硬化的免疫调节作用机制，为临床开展应用MSCs治疗多发性硬化提供科学依据。

多发性硬化（MS）是中枢神经系统（CNS）常见的自身免疫性脱髓鞘疾病。已有研究显示间充质干细胞（MSCs）对多发性硬化具有显著的治疗效果，但具体作用机制仍不清楚。我们已在前期的研究中发现间充质干细胞能有效地促进实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠神经功能的恢复，并伴随着CD5+调节性B淋巴细胞及其分泌的IL-10水平显著增加，但哪些机制参与了MSCs对CD5+调节性B淋巴细胞的影响仍不清楚。在本研究中我们进一步证实了中剂量的MSCs（1x10^6个细胞）能更有效地促进EAE小鼠神经功能的恢复；同时还发现MSCs治疗能促进EAE小鼠脾脏细胞中CD5+调节性B淋巴细胞和CD8+CD28-调节性T细胞比例的增加，并可抑制CD4+T淋巴细胞分泌IFN-γ。为了进一步阐明其具体的作用机制，本研究还采用CD5+调节性B淋巴细胞对B细胞缺陷的EAE小鼠进行过继治疗，明确CD5+调节性B淋巴细胞在MSC治疗EAE中的作用。同时还进一步采用CD19-/-小鼠构建EAE模型，并在CD19-/-EAE小鼠发病高峰期分别予以PBS、MSCs和CD5+调节性B淋巴细胞进行治疗，进一步证实了CD5+调节性B淋巴细胞治疗能有效地促进EAE小鼠神经功能的恢复，并抑制中枢神经系统的炎症细胞的浸润和脱髓鞘改变，这可能与通过IDO信号通路抑制CD4+T淋巴细胞分泌IFN-γ（Th1）密切相关。这为今后临床开展应用MSC治疗多发性硬化提供了新的理论依据。