利用结肠HDACs抑制信号与肿瘤MDSCs免疫"逃逸"通路诱导小鼠心脏移植免疫耐受的策略与机制

Treg be considered to play "Protagonist"to induce transplantation tolerance. Recently,SCFAs-HDACs inhibition pathway Localized in the colon has been found which can Increase Foxp3 expression of Treg cells and enhance the high colonic bacterial load tolerance. while HDACs inhibition can induce the formation of monocytic myeloid-derived suppressor cells (MO-MDSCs), MD-MDSCs in the tumor pathological environment can induce Tregs generation and "homing"them to local tumor Participating Immune "escape" .So we propose two hypotheses that colon and tumor local immune regulatory mechanisms apply equally to organ transplantation environment. In the experiment,we will obtain donor MO-MDSCs and Receptor foxp3 high iTreg in vitro through the HDACs inhibitors. Through the MO-MDSCs intervention before heart transplantation in mice we cause receptor immunosuppressive microenvironment and Treg accumulation in vivo, and then "home" adoptive Foxp3 high iTreg to graft site, so we solve the shortage of Treg cell therapy efficacy and targeting in organ transplantation.while we apply the targeting technology to further confirm the Treg migration "homing" depends on the chemokine receptor CCR5.

Treg被视为在诱导移植免疫耐受中扮演"主角"，最近发现在结肠存在上调Treg细胞Foxp3表达的SCFAs-HDACs抑制通路。同时发现HDACs抑制也可诱导骨髓细胞分化成具有免疫抑制活性的单核系髓源性抑制细胞（MO-MDSCs），而MO-MDSCs在肿瘤病理环境下具有诱导Treg生成并"归巢"Treg到肿瘤局部参与免疫"逃逸"的功能。我们提出结肠和肿瘤局部的免疫调控机制同样适用于器官移植环境的假说。在实验中我们将在体外应用HDACs抑制剂诱导获取供体MO-MDSCs及受体Foxp3high iTreg,并通过小鼠心脏移植前输入MO-MDSCs造成受体内免疫抑制微环境和Treg蓄积，然后趋化后继输入的Foxp3 high iTreg "归巢"移植部位，从而解决器官移植后Treg细胞治疗效力不足、靶向差的问题，同时我们应用靶向技术进一步证实Treg的"归巢"依赖于趋化因子受体CCR5 。

结肠存在上调Treg细胞Foxp3表达的HDACs抑制通路，而HDACs抑制剂也可诱导骨髓细胞分化成具有免疫抑制活性的单核系髓源性抑制细胞（MO-MDSCs），本项目在体外实验中证实采用HDAC6抑制剂Tubastatin A HCI诱导分化不同亚群T细胞可以获取foxp3表达更强的treg细胞，这些细胞具有更强的免疫抑制功能，同时也证实Tubastatin A HCI可以诱导BM细胞向单核细胞系分化，这些细胞具有免疫抑制活性。因此认为HDACs抑制剂参与是免疫抑制类细胞的基因后修饰与调节的关键因素。在肿瘤组织周围MO-MDSCs细胞具有趋化外周TREG 的功能，本实验进一步证明体外培养的MO-MDSCs同样具有趋化iTreg细胞的功能，当MO-MDSCs过继给受体心脏移植小鼠后，再次过继iTreg细胞，MO-MDSCs可以趋化iTreg细胞归巢移植心脏，而这一作用可以被CCR5拮抗剂TAK-778所阻断。总之，本项目研究认为HDACS抑制剂可以靶向免疫抑制细胞，对该类细胞的分化与功能维持具有重要意义，同时利用HDACS抑制诱导分化而来的MO-MDSCs与ITREG细胞的联合过继，将更利于抑制器官免疫耐受微环境的形成。