八号膏对烧伤脓毒症“二次打击”肠功能的影响

临床烧伤中脓毒症导致多器官功能障碍综合征 (multiple organ dysfunction syndrome, MODS)是重大的治疗问题。我院烧伤科临床应用多年的制剂八号膏能明显治疗烧伤，改善烧伤病人预后，其作用机制值得深入探究。研究表明，MODS中致炎因子的过度生成和中性粒细胞、单核／巨噬细胞凋亡障碍是导致疾病发生恶化的两个重要因子，而NF-κB的活化则是其中一个中心环节。本课题在八号膏药效研究基础上，探讨烧伤脓毒症中二次打击的重要脏器肠功能的变化，观察八号膏对实验性烧伤脓毒症大鼠高迁移率族蛋白B1等细胞因子表达情况的影响，以及脓毒症过程中肠组织通透性和菌群移位的变化，通过检测肠组织核因子-κB信号通路中相关蛋白的表达和分布，比较肠组织中NF-κB细胞信号传导通路的变化，从肠功能角度阐明八号膏干预烧伤脓毒症作用的分子机制，将为中医药防治烧伤脓毒症提供新思路、新方法。

临床烧伤中脓毒症导致多器官功能损伤是重症烧伤患者最主要的死亡的原因，是临床治疗中面临的主要问题之一。烧伤导致肠通透性增高，进而细菌/内毒素移位，这是造成烧伤脓毒症二次打击的主要原因之一。我院烧伤科临床应用多年的制剂八号膏，能显著促进各类烧、烫伤创面的愈合，对大面积重症烧伤患者具有保护作用，但其作用机制尚不明确，限制其进一步推广应用。因此本课题采用小面积深II度烫伤模型以及烧伤脓毒症“二次打击”模型，分别观察八号膏对创面愈合的促进作用以及对烧伤脓毒症的保护作用及其机制。1.八号膏对深II度烫伤创面的保护作用：复制小面积深II度烫伤模型，观察创面愈合情况，并于不同时间点取创面皮肤及血清，分别检测XOD、MDA、SOD、HMGB1、TNF-α等氧化应激及炎症指标，探讨八号膏对创面的保护作用及可能机制。2.建立烫伤脓毒症二次打击模型，ELISA法检测八号膏对HMGB1、IL-10、TNF-α、IL-1β等炎性因子的水平的影响，Western blotting和免疫组化法分别检测HMGB1、TGF-β1蛋白的表达。结果发现:1.八号膏高、中剂量(0.54g/d、0.27g/d)能显著降低深II度烫伤后创面含水量，促进创面的愈合。其机制可能是通过下调创面XOD、MPO的活性，抑制MDA的产生，同时上调SOD的活性和GSH的含量。同时八号膏可以降低烫伤后TNF-α、IL-1β和HMGB1的水平，提示八号膏可能通过抗炎及抗氧化途径保护深II度烫伤创面。2.八号膏不同剂量（3g/d、1.5g/d、0.75g/d）可降低血清中D-LA、DAO以及FITC-D的含量，提示八号膏能够减轻烧伤脓毒症肠屏障功能的损伤，同时降低血清中AST、ALT的含量，说明八号膏对烧伤脓毒症肝功能也具有保护作用。此外，八号膏能显著降低烧伤脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-1β的水平，上调IL-10的含量；免疫组化及Western blotting结果提示八号膏能下调HMGB1的表达，上调TGF-β1的表达，提示八号膏可能通过调控HMGB1的表达，进而下调多种炎性因子的表达，同时上调TGF-β1的表达，维持肠屏障功能，从两个方面保护肠屏障功能，达到防治烧伤脓毒症的作用。以上结果为阐明八号膏促进创面愈合的作用机制和防治烧伤脓毒症提供了实验依据。